一种澳洲坚果叶片总蛋白质的高效提取方法

摘要

本发明公开了一种澳洲坚果叶片总蛋白质的高效提取方法。包括以下步骤：将澳洲坚果新鲜叶片液氮研磨粉碎后，加入预冷裂解液PW1进行一次提取，经固液分离后得到第一沉淀，清洗并晾干第一沉淀；加入提取液PW2进行二次提取，经固液分离后得到第二上清液，加入预冷甲醇溶液，离心，获得第二沉淀，清洗并烘干第二沉淀；加入溶解液PW3进行三次提取，经固液分离后得到第三上清液，即得。本发明以新鲜澳洲坚果叶片为材料，向澳洲坚果叶片粉末加入本发明的3种提取液可有效避免原料氧化，避免蛋白质降解，总蛋白质得率高，所提取蛋白纯度高，SDS‑PAGE电泳条带整洁清晰，并适用于Western Blot分析。