韭菜β-木糖苷酶的分离纯化与部分性质研究

摘要

新鲜韭菜经匀浆、缓冲液提取、硫酸铵分级沉淀、羧甲基离子交换层析(carboxymethyl-sepharose,CM-Sepharose)再通过Superdex-200凝胶过滤层析,从而获得电泳纯的-木糖苷酶.该酶的比活力达到18.25 U/mg,纯化倍数为12.59,回收率为1.83％,分子质量为123.02 kD,亚基分子质量为61.51kD.通过对β-木糖苷酶的酶学性质研究得到最适温度为65℃,最适pH值为4.该酶在25～55℃及pH 3.0～5.0的范围内有较好的稳定性;在最适条件下测得其米氏常数(Km)值为0.28 mmol/L;甲醇、乙醇、异丙醇及十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)和Ag+对该酶具有抑制作用,Mn2+和Co2+对该酶具有一定的激活作用.