黑曲霉β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质研究

摘要

利用硫酸铵盐析、季氨乙基-琼脂糖凝胶FF(Q-Sepharose FF)离子交换层析、苯基-琼脂糖凝胶6 FF(Phenyl-Sepharose 6 FF)疏水层析和丁基-琼脂糖凝胶HP(Butyl-Sepharose HP)疏水层析对黑曲霉来源β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,采用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子质量,并对其酶学性质进行研究.结果表明,经分离纯化后得到分子质量约为116 kDa的β-葡萄糖苷酶,纯化倍数达到50.39倍,回收率为4.65％,比酶活为103.80 U/mg,该β-葡萄糖苷酶的最适反应温度为60°C,最适反应pH值为5.0,在温度30～50 °C,pH 2.0～8.0之间具有较好的稳定性.