红曲霉与乳酸菌混合发酵藜麦制备降压肽

摘要

利用红曲霉与乳酸菌混合发酵藜麦制备降压肽,以期得到一种藜麦蛋白源血管紧张素转化酶(angio-tensin-I converting enzyme,ACE)抑制肽.从福建古田等地采集到的红曲样品中分离得到6株紫色红曲霉(Monascus purpureus)并结合实验室保存的菌种,对蛋白酶酶活力、蛋白水解度、粗多肽得率3个指标进行考察,筛选出适合发酵的菌种,并通过混菌验证试验确定戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)22227和紫色红曲霉(Monascus purpureus)4422为最佳发酵组合,ACE抑制率高达84.21％.通过单因素试验优化发酵条件,当培养温度为28°C,P.pentosaceus 22227和M.purpureus 4422菌种比例为为2:1,发酵7 d,制备的降压肽ACE抑制率最高,达到83.13％.将所得发酵上清液依次经过透析、葡聚糖(Sephadex G-25)凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱(reversed phase-HPLC,RP-HPLC)3个步骤提纯,最终使得降压肽的ACE抑制率提高到了89.75％;氨基酸成分分析表明,所得降压肽含有12种氨基酸,其中包括丙氨酸、缬氨酸和甲硫氨酸等疏水性氨基酸,且占到氨基酸总量的50％以上,这可能和降压效果有关.该降压肽在低温、弱酸性条件下和体外连续消化试验过程中也能保持良好的活性.