蛹虫草虫草多糖的分离纯化、分子构象分析及抗氧化活性研究

摘要

选用蛹虫草粗多糖进行分离纯化,借助二乙氨基乙基纤维素52(DEAE-52)柱层析得到虫草中性多糖(Cordyceps militaris polysaccharide,CMP).采用紫外可见光谱(UV-visible)和傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)表征CMP,同时选用气质联用技术(GC-MS)测定单糖组成,并采用多角度激光光散射凝胶渗透色谱和示差联用(gel permeation chromatographymulti-angle laser light scattering-reflective index,GPC-MALLS-RI)测定CMP重均分子质量(Mw)和均方根旋转半径(Rg),同时分析CMP在溶液中的构象.此外,对粗多糖和CMP的抗氧化活性进行比较.结果表明:经DEAE-52水洗的中性多糖CMP质量分数为76.63％,比粗多糖(44.95％)纯度提高70.48％;在260 nm和280 nm处均无明显紫外吸收;FT-IR说明CMP为α-构型多糖;其单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比为1∶3.90∶1.51;Mw和Rg分别为2.432×107 g/mol,31 nm;CMP在溶液状态下为高枝化度结构.1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-联氨-双-(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)自由基清除实验表明,CMP具有明显的抗氧化活性,且自由基清除率高于粗多糖.