产胸苷磷酸化酶短乳杆菌融合菌株的构建及其特性

摘要

利用紫外加热灭活双亲原生质体技术对短乳杆菌原生质体进行融合,考察短乳杆菌原生质体制备、再生及融合的影响因素,并对短乳杆菌融合子产酶能力和遗传稳定性进行了研究.结果表明:短乳杆菌在含0.6％甘氨酸发酵培养液培养至对数生长期,2 mg/mL溶菌酶于37℃恒温水浴酶解脱壁2h,原生质体制备率和再生率可达95％和48％；20 W紫外灯距离20 em照射50 min,60℃处理短乳杆菌原生质体60 min,原生质体的灭活率几乎为100％；将双亲灭活的原生质体用40％ PEG6000,30℃恒温融合10 min,筛选融合子F15并进行5次传代测试其胸苷磷酸化酶活均在1.500 U/mg湿菌体,较亲本酶活提高了50％.