人胰岛素B27K-DTrI前体在毕氏酵母中表达条件的优化

摘要

目的优化甲醇酵母表达系统,提高B27K-DTrI前体表达量。方法用不同浓度的G418 YPD平板、联合Real-time PCR筛选高拷贝菌株。优化高拷贝菌株的最佳起始诱导吸光度A、诱导时间、诱导剂浓度等表达条件。结果筛选到高拷贝菌株S3菌,最佳诱导条件为诱导起始A600约6.0,甲醇诱导浓度0.75%,诱导时间72 h,目的蛋白表达量118 mg/L。结论通过条件优化实验,为人胰岛素B27K的产业化提供了可靠的实验基础。