基于免疫磁珠前处理的荧光免疫层析法定量检测牦牛肉中金刚烷胺

摘要

研究旨在提供一种基于免疫磁珠分离、富集和净化前处理,检测牦牛肉中金刚烷胺残留的荧光免疫层析定量分析方法。通过对免疫磁珠偶联液、抗体偶联量、偶联时间、微球的抗体标记量、金刚烷胺抗原和羊抗鼠二抗包被浓度等进行优化,初步建立了基于免疫磁珠前处理的时间分辨荧光免疫层析方法(TRIFA),并对其方法的灵敏度、准确度和精密度进行了评价。结果表明,经过优化后荧光微球抗体标记量为6μL,抗原和羊抗鼠二抗的包被浓度均为0.52μg/mL;免疫磁珠偶联液为0.02 mol/L PB、磁珠与抗体最佳偶联量为100μg、捕获时间为60 min;所建立方法的检出限为0.46μg/kg,IC50为2.327μg/kg,线性范围为0.87~7.32μg/kg,回收率为82.05%~109.95%,批内变异系数为4.77%~8.86%,批间变异系数为9.13%~11.92%。经验证,牦牛肉样本检测结果与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)结果一致。结论:该研究建立的基于免疫磁珠前处理的时间分辨荧光免疫层析方法适用于牦牛肉样品中金刚烷胺类药物残留的检测,方法的灵敏度高、稳定性好,说明免疫磁珠-荧光免疫层析法可作为牦牛肉中金刚烷胺快速检测的有效手段。