蛋白酪氨酸激酶抑制剂对脑血管平滑肌细胞Ca2+池操纵性Ca2+内流的影响

摘要

目的研究蛋白酪氨酸激酶和蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂对牛脑血管平滑肌细胞(CSMC)Ca2+池操纵性Ca2+内流的影响.方法采用培养的CSMC,在生物荧光双波长影像分析系统用Fura-2/Am荧光探针测定单个细胞内游离Ca2+浓度.结果 (1)蛋白酪氨酸激酶抑制剂(genistein,2.5,5,10 μmol*L-1)能浓度依赖性降低内皮素-1(ET-1,10-7 mol*L-1)刺激引起的CSMC Ca2+内流,抑制率分别为5.6%±2.9%、25.6%±3.9%、48.9%±3.7%;蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂(vanadate,2,4,8 μmol*L-1) 能浓度依赖性升高CPA刺激引起的CSMC Ca2+内流,增加比率分别为8.2%±3.9%、18.8%±4.9%、46.6%±6.9%;(2)genistein (2.5,5,10 μmol*L-1)能浓度依赖性降低ATP(10 μmol*L-1)刺激引起的CSMC Ca2+内流,抑制率分别为6.7%±2.6%、24.6%±6.5%、51.3%±6.9%; vanadate (2,4,8 μmol*L-1) 能浓度依赖性升高ATP刺激引起的CSMC Ca2+内流,增加比率分别为4.8%±2.0%、28.5%±4.6%、49.6%±3.3%;(3)genistein (2.5,5,10 μmol*L-1)能浓度依赖性降低环匹阿尼酸(Cyclopiazonic acid,CPA,10 μmol*L-1)刺激引起的CSMC Ca2+内流,抑制率分别为6.5%±3.0%、22.5%±5.2%、44.6%±4.2%; vanadate (2,4,8 μmol*L-1)能浓度依赖性升高CPA刺激引起的CSMC Ca2+内流,增加比率分别为6.1%±3.1%、19.6%±5.1%、46.7%±2.8%.结论蛋白酪氨酸激酶/磷酸酶参与ET-1、ATP、CPA触发的CSMC Ca2+池操纵性Ca2+内流.