Real-Time PCR探针法定量检测沙门菌方法的建立及应用

摘要

目的 建立快速、特异性好、灵敏度高的Real-Time PCR方法定量检测沙门菌.方法 根据编码沙门菌肠毒素基因stn的核苷酸序列,设计荧光探针和一对引物,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立定量检测沙门菌的方法.结果 建立的Real-Time PCR方法有很好的特异性与敏感性,所检测沙门菌结果均为阳性,而非沙门菌均为阴性;标准曲线相关系数为R2=0.993,其敏感性为5 CFU.运用该方法对108份鸡粪便、50份鸡肉以及58份水样进行检测,阳性率分别为3.7%(6/108)、 4%(2/50)和3.4%(2/58),与传统细菌分离检测结果相符.结论 结果表明该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点,此研究为环境及疾病诊断中沙门菌快速检测提供了新方法.