应用real-time PCR定量检测土壤中小麦纹枯病菌方法的建立

摘要

根据小麦纹枯病菌Rhizoctonia cerealis AG-D融合群ITS区的DNA序列设计特异性引物对WKF-8/WKR-8,对引物的特异性和灵敏性进行检测,建立并优化基于SYBR GreenⅠ荧光染料法的real-time PCR反应体系,绘制标准曲线.检测范围在1.0×10-3～10ng/μl有良好的线性关系,相关系数R2为0.997,扩增效率为99.5％,灵敏度比常规PCR方法高100倍.结果表明,该方法具有快速、特异性强、敏感度高等特点.