辛伐他汀可刺激骨髓间充质干细胞的成骨分化

摘要

背景:辛伐他汀可显著刺激骨髓间充质干细胞成骨分化,但机制不明。近年研究证实p38 MAPK信号通路参与调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的过程。目的:观察p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路在辛伐他汀体外干预刺激骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用。方法:分离培养SD大鼠股骨和胫骨骨髓间充质干细胞,第2代骨髓间充质干细胞分为3组:对照组、辛伐他汀组(加入10^-7 mol/L辛伐他汀)、阻断剂组(加入辛伐他汀30 min前给予10μmol/L p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580),均使用含有10 mmol/Lβ-甘油酸磷酸钠、50 mg/L抗坏血酸的DMEM完全培养基进行成骨诱导分化。各组干预第6天进行碱性磷酸酶染色;第6天和第12天采用Western blot法检测p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK的表达;第12天采用免疫荧光染色和实时荧光定量聚合酶链反应检测骨钙素、Ⅰ型胶原的表达;第21天茜素红染色观察钙结节形成情况。结果与结论:①辛伐他汀组碱性磷酸酶表达和基质矿化能力显著高于对照组,阻断剂组显著低于辛伐他汀组(P<0.05);②辛伐他汀组磷酸化p38 MAPK与p38 MAPK比值高于对照组(P<0.05),阻断剂组低于辛伐他汀组(P<0.05);③辛伐他汀可以促进骨钙素和Ⅰ型胶原的表达,而阻断剂组显著低于辛伐他汀组(P<0.05);④结果表明,辛伐他汀可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,这一作用可能与促进p38 MAPK磷酸化进而提高该通路活性有关。