SD大鼠骨髓间充质干细胞在-80℃低温条件下的冻存

摘要

背景：以-80℃作为冻存温度条件,探索一种低消耗,简单易行的骨髓间充质干细胞贮存方法。目的：筛选适于骨髓间充质干细胞冻存的最适保护液,并验证骨髓间充质干细胞经较长期低温冻存后的生物学特性。方法：贴壁培养骨髓间充质干细胞,免疫荧光法鉴定骨髓间充质干细胞的生物学特性及纯度;以-80℃为温度条件,不同配比的低糖DMEM培养基、胎牛血清和二甲基亚砜作为冻存保护液,短期冻存骨髓间充质干细胞,选择适于骨髓间充质干细胞冻存的最适保护液;以选择出的保护液冻存骨髓间充质干细胞,分别于1,3,6个月复苏,并继续培养,传代;对传代细胞行免疫荧光鉴定,确定在-80℃下保护液对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响。结果与结论：采用80%DMEM＋体积分数为10%胎牛血清＋10%二甲基亚砜作为冻存保护液,适于在-80℃条件下冻存骨髓间充质干细胞,复苏后的细胞能够在体外增殖,并正常传代,冻存后的骨髓间充质干细胞仍可保持原有的生物学活性。