成人骨髓间充质干细胞生物学特性及低温冻存对其影响的研究

摘要

该研究目的在于建立稳定的MSCs体外培养和扩增体系以及冻存最佳方案.研究分二部分:一、成人骨髓间充质干细胞体外培养、扩增及其生物学特性研究;二、低温冻存对成人骨髓间充质干细胞生物学特性影响的研究.该研究得出以下结论:1.经密度梯度离心贴壁培养、传代扩增方法可以获得细胞形态一致、增殖能力强的MSCs.2.MSCs稳定表达黏附分子CD29、CD44、CD166:造血系细胞抗原CD14、CD34、CD45、HLA-DR表达阴性.3.MSCs细胞周期以G<,0>/G<,1>期为主,细胞超微结构示细胞胞浆具丰富粗面内质网.表明细胞具较强增殖能力以及蛋白质合成功能.4.培养所得MSCs具有多向分化能力,可以向脂肪、成骨和神经元细胞分化.5.用5％DMSO-30％FBS-DMEM冻存保护液、程控降温冻存复苏后细胞活力高.6.程控冻存后传代培养细胞增殖能力较冻存前增强.7.程控冻存后细胞稳定表达其表面黏附分子:CD29、CD44、CD166,且冻存不同时间其表达无明显改变.8.冻存后复苏培养细胞保持其多向分化潜能,与冻存前比较无显著性差异.9.采用5％DMSO-30％FBS-DMEM冻存保护液和程控降温的冻存体系,可较完整保持MSCs生物学特性,是深低温保存MSCs的理想方案.

目录

前 言

第一部分成人骨髓间充质干细胞体外培养、扩增和生物学特性研究

材料和方法

结果

讨论

第二部分低温冻存对成人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

综述一骨髓间充质干细胞研究进展

综述二造血干细胞移植后肝静脉阻塞病的研究进展

致谢