一例复合杂合F11基因变异所致的遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症家系的分析

摘要

目的 对1个遗传性凝血因子Ⅺ(coagulation factor FⅪ,FⅪ)缺陷症患者家系进行临床表型和基因变异分析,寻找致病变异并初步探讨其分子机制.方法 在Stago全自动血凝仪上检测先证者及其家系成员(共3代6人)活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)等血凝相关检测项目,FⅪ活性(FⅪ activity,FⅪ:C)及其他有关凝血因子的活性;用ELISA法检测FM抗原(FⅪantigen,FⅪ:Ag).提取基因组DNA,用Sanger测序法测定F11基因所有外显子及侧翼序列;用ClustalX-2.1-win软件分析变异氨基酸的保守性;用MutationTaster在线生物信息学软件分析变异是否有害;用Swiss-Pdb Viewer模型分析软件分析变异氨基酸对蛋白结构的影响.结果 先证者APTT 明显延长,为94.2s;FⅪ:C和FⅪ:Ag分别降低为1％和1.3％;先证者父亲、母亲、儿子和女儿APTT分别为42.1 s,43.0s、42.5 s和41.0 s,FⅪ:C和FⅪ:Ag均降低至正常值的一半左右;先证者丈夫APTT,FⅪ:C和FⅪ:Ag均正常.测序结果显示先证者F11基因存在第10外显子c.1103G>A(p.Gly350Glu)杂合错义变异和第13 外显子c.1556G>A(p.Trp501stop)杂合错义变异.先证者父亲和女儿携带p.Gly350Glu 杂合错义变异;母亲和儿子携带p.Trp501stop杂合无义变异.保守性分析表明Gly350和Trp501在同源物种间高度保守.MutationTaster在线生物信息学软件对两个变异的预测结果均为"disease causing",表明变异有害.蛋白模型分析表明,p.Gly350Glu变异影响了蛋白质的结构及稳定性.结论 p.Gly350Glu和p.Trp501stop复合杂合变异可能是该家系遗传性FⅪ缺陷症的分子发病机制.