软脂酸对人脐静脉内皮细胞凋亡影响及其机制的研究

摘要

目的 探讨软脂酸(PA)对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及其可能机制.方法 (1)将人脐静脉内皮细胞分为:①正常对照(NC)组；②PA组(浓度分别为0.2、0.4、0.8 mmol/L),培养24 h,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术及Hoechst 33258核染色检测各组细胞凋亡情况.(2)人脐静脉内皮细胞分为:①NC组；②PA组(0.4 mmol/L)；③PA+雷帕霉素(PA+ Rapamycin)组.采用Western blot法分析各组马铃薯球蛋白(Tuberin)、P-Tuberin、核糖体蛋白S6激酶(S6K)、P-S6K、Bcl-2、Bax,以及Caspase3蛋白表达水平.结果 经MTT检测显示,与NC组比较,PA组细胞增殖(OD值)下降(P＜0.05),且呈剂量依赖性.经Western blot分析显示,与NC组比较,PA组细胞凋亡率增加(P＜0.05),且呈剂量依赖性.与NC组比较,PA组P-Tuberin、P-Tuberin/Tuberin、S6K、P-S6K/S6K、Bax、Caspase3表达水平增高,Bcl-2表达降低(P＜0.05)；PA+ Rapamycin组S6K、P-S6K/S6K、Bax、Caspase3 表达水平低于PA组,Bcl-2表达高于PA组(P＜0.05).结论 PA能够诱导人脐静脉内皮细胞凋亡,其机制可能是通过上调tuberin/mTOR活性,而降低Bcl-2表达、增加Bax及Caspase3表达,最终导致血管内皮细胞凋亡.