支气管肺发育不良新生大鼠肺组织Occludin的表达及其对肺上皮通透性的影响

摘要

目的研究高体积分数氧（高氧）致新生大鼠支气管肺发育不良（BPD）早期肺组织Occludin蛋白及mRNA的动态变化，以及其对肺上皮通透性的影响。方法新生Wistar大鼠160只，依据吸氧体积分数（FiO2）随机分为高氧组（FiO2=900mL／L）和空气组（Fi02=210mL／L），每组80只。分别于建立模型后1、3、5、7d处死大鼠后取肺组织。检测支气管肺泡灌洗液（BALF）与血清异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐（FIM）比值；采用免疫荧光染色及Western blot技术观察Occludin蛋白的分布和表达；采用反转录-PCR技术检测Occlu-din mRNA的表达。结果空气组与高氧组1 d BALF与血清FD4比值比较差异无统计学意义（1．533±O．122比1．575±0．140，P〉0．05）；与空气组比较，高氧组3dBALF与血清FIM比值有所增加（1．365±0．159比1．615±0．196，P〈0．05），5d、7d显著增力口（1．245±0．152比3．211±0．799；1．178±0．594比5．150±0．967，P均〈0．01）。免疫荧光结果显示，空气组7d肺泡上皮细胞边缘Occludin蛋白呈现连续线性分布，高氧组7d表达不连续，荧光强度较弱；空气组与高氧组1dOccludinmRNA表达比较差异无统计学意义（2．15±0．33比2．23±0．39，P〉0．05）；与空气组比较，高氧组3d、5dOccludin mRNA减少（2．46±0．27比2．00±0．19，2．62±0．28比2．15±0．20，P均〈0．05），7d减少最明显（3．08±0．43比2．01±0．34，P〈0．01）；1d、3d空气组与高氧组Occludin蛋白表达比较差异无统计学意义（1．00±0．05比1．05±0．03，1．24±0．06比1．17±0．04，P均〉0．05），与空气组比较，高氧组5d减少，差异有统计学意义（1．03±0．04比0．93±O．05，P〈0．05），7d减少最明显（0．96±0．14比0．65±O．07，P〈0．01）；高氧组Occludin蛋白的表达与肺上皮通透性呈明显负相关（r=-0．755，P〈0．01）。结论肺组织Occludin表达下调，可能导致肺上皮通透性增加，进而参与高氧致BPD早期肺水肿的发生、发展过程。