禽流感病毒H9N2与新城疫病毒在鸡成纤维细胞中共感染对病毒复制的影响

摘要

临床上禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)共同感染情况经常发生.为研究AIV与NDV在鸡成纤维细胞DF-1中的共感染对病毒复制的相互影响,首先对NDV和H9N2亚型AIV单独感染DF-1细胞时病毒的复制情况进行了分析,设定以NDV和AIV共感染细胞后12和24 h作为样品采集点,通过Western blot、间接免疫荧光和实时荧光定量PCR检测了两种病毒共感染与单独感染对病毒NP蛋白表达的相互影响.结果显示:Western blot分析表明共感染12和24 h,NDV NP蛋白的表达分别下调了70.6％(P＜0.001)和45.7％ (P＜0.001),AIV NP蛋白的表达分别下调了61.5％(P＜0.001)和82.8％(P＜0.001);免疫荧光分析显示共感染组细胞中NDV和AIV的NP蛋白丰度在感染12 h时间点分别下调81.1％(P＜0.001)和65.5％(P＜0.001),24 h时则分别下调41.2％ (P＜0.05)和47.4％ (P＜0.001);qPCR结果也证实共感染12和24 h组NDV NP的mRNA表达水平分别下调了64.30％ (P＜0.001)和64.4％ (P＜0.05),AIV NP的mRNA表达水平分别下调了61.5％ (P＜0.001)和63.0％(P＜0.001).本研究证明AIV与NDV共感染在细胞水平上可引起病毒复制的相互抑制,为研究NDV和AIV共感染机制在细胞水平上奠定了基础.