DNA永生化链和肿瘤干细胞关系的初步研究

摘要

目的评估表达Ngn3的细胞对成体胰岛维护和更新的作用及其意义。方法用6-8周龄的C57BL／6小鼠分离胰岛。胆总管内插管成功后，切除胰腺组织并用浓度为2．5mg／ml胶原蛋白酶Ⅴ灌注消化。手工拣取胰岛后，置于60mm培养皿内，每个培养皿内含10—12个胰岛，用RPMI-1640（12．5mmol／LHEPES，5．2mmol／L葡萄糖和2％胎牛血清）培养液培养。用A6抗体，胰岛素抗体，胰高血糖素抗体，Nestin抗体，Ngn3抗体和5’-溴-2-脱氧尿嘧啶（5-bromo-2’-deoxy-uridine，Brdu）抗体进行胰岛细胞免疫荧光染色。结果在增殖的胰岛细胞中，只有不到15％的细胞表达Ngn3，其中约有30％以上的细胞同时表达A6。在培养的胰岛细胞中存在表达Ngn3的细胞，这一结果与其他在胚胎发育和成体胰岛中的研究结果一致。本研究发现培养的胰岛细胞中存在同时表达A6和Ngn3的细胞。A6被认为是可分化为胆管上皮细胞的肝脏前体细胞的标记物。胰岛内表达A6的细胞可能来源于成体胰管，并迁移至胰岛内。细胞表达A6的同时表达Ngn3，表明这些细胞在胰岛内可分化为内分泌细胞。