Jak2v617f基因过表达及SAA患者血清对小鼠32D细胞体外培养中细胞因子浓度的影响

摘要

目的 观察Jak2v617f转染小鼠32D细胞后,与重症再生障碍性贫血患者(severe aplastic anemia,SAA)血清共培养,了解Jak2v617f对SAA患者血清细胞因子水平的影响.方法 利用DNA克隆技术,将mutJAK2 (v617f)慢病毒转染至32D细胞,检测未转染组与转染组细胞分别与正常血清与SAA患者血清培养后,血清细胞因子(IL-2、CD69、IFN-γ、TNF-α)水平的变化;同时观察未转染组细胞与SAA患者血清培养,加入Jak2抑制剂AZD 148后,上述血清细胞因子水平的变化.结果 SAA组(SAA血清+32D)与对照组(正常血清+32D)比较,血清细胞因子CD69差异无统计学意义(P＞0.05),SAA组IL-2、IFN-γ则下降(P＜0.05),TNF-α下降更明显(P＜0.01);Jak2v617f组(Jak2v617f+正常血清+32D)则相反,除TNF-α外,余血清细胞因子水平均显著高于对照组(P均＜0.01);Jak2v617f+SAA组(Jak2v617f+SAA血清+32D)除CD69较对照组显著升高外(P＜0.01),余与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);AZD148组(正常血清+32D+Jak2抑制剂)与对照组比较,除CD69 (P＞0.05)外,余细胞因子均较对照组减少(P＜0.05或P＜0.01);SAA+AZD 148组(SAA血清+32D+Jak2抑制剂)与对照组比较,除CD69较对照组显著升高(P＜0.01)外,余均显著减少(P均＜0.01).结论 小鼠32D细胞Jak2v617f基因的过表达,有利于弥补SAA血清细胞因子的消耗;小鼠32D细胞加入Jak2抑制剂则有可能加重SAA血清细胞因子的消耗.