引入中性氨基酸对木聚糖酶XynZF-2热稳定性的影响

摘要

通过对黑曲霉(Aspergillus niger) XZ-3S木聚糖酶XynZF-2进行生物信息学分析,在N-端区域引入半胱氨酸,定点突变E27C,构建突变基因xyn-E27C,并在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达.酶学性质分析发现,突变酶Xyn-E27C的最适温度为45℃,与原酶XynZF-2相比提高了5℃.在40℃条件下,突变酶Xyn-E27C的半衰期t1/240℃为100 min,相比原酶XynZF-2 (t1/245℃=55 min)提高了45 min.在45℃条件下,突变酶Xyn-E27C的半衰期t1/245℃为24 min,相比原酶XynZF-2(t1/245℃=7 min)提高了17 min;突变酶Xyn-E27C的最适pH值由5.0提高至5.5,而pH稳定范围均为5.0～9.0.因此,定点突变E27C对木聚糖酶XynZF-2的热稳定性以及最适pH值均有重要影响.