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厚壳贻贝Mytilin-1成熟肽在毕赤酵母中的重组表达及其抑菌活性

         

摘要

贻贝素(Mytilins)是一类主要在贝类血细胞中表达的阳离子小分子抗菌肽,包括多种同工型,它们在免疫系统中发挥了重要作用,Mytilin-1是其中的一种同工型.厚壳贻贝(Mytilus coruscus)Mytilin-1的一级结构由信号肽、成熟肽和C端的延伸肽组成;其成熟肽决定了Mytilin-1的生物学活性,它由34个氨基酸残基组成,其中8个保守的半胱氨酸残基在空间上能形成4对二硫键,对Mytilin-1的稳定性和活性起了关键作用.以厚壳贻贝的Mytilin-1成熟肽为重组DNA表达的目的蛋白,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏爱性对编码该成熟肽的密码子进行优化,合成的目的基因"mMy1"与表达载体pPICZαA连接后电转至毕赤酵母X-33,通过高浓度博来霉素筛选高拷贝酵母转化子,获得的阳性转化子在29℃、250 r/min、pH6.0的条件下,使用1% 甲醇诱导表达96 h;培养液上清经Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析证明:重组mMy1在毕赤酵母X-33中得到成功表达,其分子量为4.8 kD.抑菌试验表明,重组mMy1对革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)以及革兰氏阴性的大肠杆菌(Escherchia coli)具有抑菌活性.

著录项

  • 来源
    《生物技术通报》 |2019年第7期|54-60|共7页
  • 作者单位

    上海海洋大学食品学院 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心;

    上海 201306;

    上海海洋大学食品学院 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心;

    上海 201306;

    上海海洋大学食品学院 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心;

    上海 201306;

    上海海洋大学食品学院 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心;

    上海 201306;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    厚壳贻贝; Mytilin-1成熟肽; 毕赤酵母; 重组表达; 抑菌活性;

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