人骨形态发生蛋白-7成熟肽毕赤酵母表达重组子的构建

摘要

目的:构建人骨形态发生蛋白-7(bone morphgenetic protein-7,BMP-7)巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)表达重组子.方法:以本室保存的重组质粒pBV220/BMP-7为模板,经PCR扩增出人BMP-7成熟肽编码序列,先以A-T连接方式克隆入pGEM-Teasy载体,再将其克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9中,重组质粒线性化后PEG法转化入毕赤酵母菌株GS115,用PCR方法筛选转化子.结果:DNA序列分析和PCR鉴定表明成功构建了人骨形成蛋白-7(BMP-7)毕赤酵母表达重组子.结论:为今后基因工程大量生产BMP-7打下基础.