有机硅介质中脂肪酶印迹体系的优化及印迹机制的初步研究

摘要

采用溶胶-凝胶固定化工艺,以C6～C14之间的5种饱和脂肪酸和月桂醇为印迹分子,考察了碳链长度、印迹分子浓度对洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶PS酯化活性的影响.研究表明,印迹分子的疏水性与底物分子的相似性对印迹效果影响较大,疏水性越强,与底物分子相似性越大,印迹效果越好;异辛烷洗脱印迹分子,对酶活的保持最好;随着碳链长度的增加,印迹酶对甲醇的耐受性逐渐降低;反应体系中加入微量水(10 μL),对酯化酶活具有激活作用;经印迹的固定化酶使用5个批次后,相对酶活为0.65.对印迹机理的初步探讨表明,印迹分子对脂肪酶酯化活力的提高主要通过影响聚合物的结构来改变固定化酶的酶活,即分子印迹作用.