野生和深层培养桦褐孔菌抗衰老活性的研究

摘要

桦褐孔菌，学名Inonotus obliquu（以下简称IO）。主要分布于北纬45°～50°的地区。常生于白桦、银桦、榆树和赤杨等活立木的树皮下。桦褐孔菌已被证明含有多种生物活性成分，在预防和治疗多种疾病方面有着独特的效果。研究认为多糖、三萜类化合物和多酚类物质是桦褐孔菌中的主要活性成分。但野生桦褐孔菌资源稀缺。所以对深层培养桦褐孔菌（简称CIO）的研究显得尤为重要。
　　 本文研究CIO发酵培养基。以菌丝体生物量和多糖含量为指标通过对五种发酵培养基的比较，确定PD培养基为最优发酵培养基:葡萄糖2％，马铃薯20％，在发酵第6天多糖含量达到最大值15.23g/L，第5天菌丝体生物量达到最大值3.76g/150mL，明显优于其他培养基，而且它具有成本低廉的优点适合工业化生产。CIO经过三级摇瓶培养接入发酵罐。培养条件:26℃±2℃，风量300L/h，200r/min，罐压0.03-0.04MPa，6d，获得深层培养桦褐孔菌作为下一步的实验材料。
　　 将CIO和IO加入果蝇饲料，以基础饲料为对照，研究CIO和IO对果蝇寿命及抗氧化能力的影响。用加入不同剂量的CIO、IO饲料喂养果蝇，每三天记录果蝇死亡数，通过计算果蝇平均寿命、半数致死时间、平均最高寿命，证明CIO和IO可有效延长果蝇寿命。随后通过测定不同饲养天数的果蝇体内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及脂质过氧化产物丙二醛含量，评价CIO、IO对果蝇抗氧化能力的影响。结果表明CIO、IO显著提高果蝇体内超氧化物岐化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活力，抑制丙二醛(MDA)的生成。可见，CIO、IO具有抗氧化能力和抗衰老的功能。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 桦褐孔菌的研究背景

1．2 桦褐孔菌的形态

1．2．1 子实体与孢子

1．2．2 菌丝

1．2．3 菌落形状

1．3 桦褐孔菌的功能特性

1．3．1 药用价值

1．3．2 抗癌作用

1．3．3 抗氧化活性

1．3．4 降血糖活性

1．3．5 抗病毒作用

1．3．6 抗炎作用

1．3．7 防治艾滋病作用

1．3．8 其他活性

1．4 液体培养桦褐孔茵及其主要活性物质

1．4．1 多糖的研究及抗氧化作用

1．5 桦褐孔菌的加工利用

1．6 衰老的自由基学说

1．6．1 自由基

1．6．2 自由基与疾病

1．7 生物体内氧化-抗氧化作用与疾病

1．7．1 抗氧化剂定义及分类

1．8 果蝇的介绍

1．9 研究目的和内容

1．9．1 研究目的和意义

1．9．2 研究主要内容

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 菌种

2．1．2 果蝇

2．1．3 原料及试剂

2．1．4 仪器与设备

2．2 实验方法

2．2．1 深层培养桦褐孔菌培养流程

2．2．2 桦褐孔菌的复壮、保存于活化

2．2．3 培养基的制备

2．2．4 指标测定

2．2．5 样品处理

2．2．6 实验动物

2．2．7 果蝇的培养条件

2．2．8 果蝇基础培养基的制备

2．2．9 果蝇给药培养基的制备

2．2．10 CIO、IO对果蝇寿命的影响

2．2．11 CIO、IO对果蝇抗氧化能力的影响

3 结果与讨论

3．1 发酵培养基的筛选

3．2 深层培养桦褐孔菌，野生桦褐子L菌对果蝇寿命的影响

3．2．1 CIO、IO对果蝇平均寿命的影响

3．2．2 CIO、IO对果蝇半数致死时间的影响

3．2．3 CIO、IO对果蝇平均最高寿命的影响

3．3 CIO与IO对果蝇SOD、CAT活力及MDA含量的影响

3．3．1 CIO与IO对果蝇体内SOD活力的影响

3．3．2 CIO与IO对果蝇体内MDA含量的影响

3．3．3 CIO与IO对果蝇体内CAT活力的影响

4 结论

5 展望

参考文献

7 攻读硕士学位期间论文发表情况

致谢