柑橘幼果中主要功能性成分分析及抗氧化作用的研究

摘要

柑橘幼果一直作为传统中药枳实的原材料，一般从果园收集后以晒干的方式保存，有关其功效成分的研究还不全面；干燥过程对其中功能性成分和抗氧化能力的影响也不清楚。因此，本试验以柑橘幼果为实验原料，研究16个不同品种柑橘幼果间功能性成分组成及含量的差异，并对不同干燥方式和不同温度热风干燥对柑橘幼果功能性成分含量及抗氧化能力的影响进行了初步研究，试验结果如下：
　　 (1)选择了浙江省内十六个具有代表性的柑橘品种(包括九种宽皮桔、两种甜橙、一种酸橙、一种柠檬、一种胡柚、一种柚子、一个柚与橙的杂交种)的幼果，研究了其中四种黄烷酮糖苷、两种多甲氧基黄酮、八种酚酸、柠檬苦素、诺米林和辛弗林的组成和含量。试验结果显示黄烷酮糖苷在柑橘幼果中大量存在，如橙皮苷在尾张温州蜜柑幼果中含量高达261.63 mg/g DW(26.1％)，柚皮苷在高橙中的含量也达到67.5 mg/g DW(6.75％)，不同品种间含量有很大差异；多甲氧基黄酮在柑橘幼果中含量相对较少，川陈皮素和橘皮素最高含量都在朱红种幼果中得到，分别为13.66 mg/g DW(1.367％)和11.95 mg/g DW(1.195％)；柑橘幼果中的酚酸主要以肉桂酸型酚酸为主；在大多数柑橘幼果中，柠檬苦素的含量要高于诺米林的含量。不同品种间辛弗林含量的测定结果按品种的顺序为：宽皮橘＞甜橙＞酸橙。
　　 (2)采用FRAP、DPPH和ABTS三种体外抗氧化方法对柑橘幼果提取液抗氧化能力进行了评价，比较了十六个柑橘幼果提取液的抗氧化能力，发现朱红种柑橘幼果提取液的总酚含量和抗氧化能力都是最强。
　　 (3)分析了FRAP、DPPH和ABTS方法测定的柑橘幼果提取液抗氧化能力与功能性物质含量之间的相关性，发现三种抗氧化方法测定的抗氧化能力与总酚、黄酮类物质总和、可提取酚酸总和的相关性极显著(p＜0.01)。基于单电子转移(SET)反应机制的三种抗氧化方法之间也具有良好的相关性。
　　 (4)以桠柑、高橙、佛柚、常山胡柚四个品种柑橘幼果为原料，分别采用冷冻干燥、60℃热风烘干和晒干三种干燥方式处理，研究了三种干燥方式对其中功能性成分含量以及提取液抗氧化能力的影响．结果显示：干燥方式对柑橘幼果中黄酮类物质的含量、酚酸的含量、辛弗林的含量都具有显著的影响(p＜0.05)，含量高低的顺序均为：冻干样品＞60℃热风烘干样品＞晒干样品；干燥方式对柑橘幼果中柠檬苦素和诺米林的含量影响不具有显著性(p＞0.05)。总酚含量为：冻干样品＞60℃热风烘干样品＞晒干样品；FRAP和DPPH体系测定的抗氧化能力为：冻干样品＞60℃热风烘干样品＞晒干样品，且具有显著性差异(p＜0.05)；但在ABTS体系下，干燥方式对柑橘幼果提取液的抗氧化能力不具有显著性差异。
　　 (5)以椪柑、佛柚、高橙和胡柚新鲜幼果为原料，分别采用30℃、45℃、60℃、90℃和120℃热风干燥样品，研究不同温度热风干燥对柑橘幼果中黄酮类化合物、酚酸、柠檬苦素类似物和辛弗林的含量以及其提取液抗氧化能力的影响。试验结果显示：热风干燥温度对柑橘幼果中黄酮类物质的含量、酚酸的含量、辛弗林的含量都具有显著的影响(p＜0.05)，60℃热风干燥样品中含量最高，较低温度和较高温度都会造成含量的降低，120℃热风干燥样品中含量达到最小值。但是热风干燥温度对柑橘幼果中柠檬苦素和诺米林的含量影响不具有显著性(p＞0.05)。干燥样品中总酚含量高低和FRAP、DPPH、ABTS体系下测定的提取液抗氧化能力的强弱顺序均为：120℃干燥样品＞90℃干燥样品＞60℃干燥样品＞45℃和30℃干燥样品，且都具有显著性差异(p＜0.05)。

目录

文摘

英文文摘

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致谢

第一章 绪论

1.1柑橘果实中功能性成分的研究进展

1.1.1黄酮类化合物

1.1.2酚酸

1.1.3柠檬苦素类物质

1.1.4生物碱

1.2柑橘果实中功能性成分的抗氧化活性的研究进展

1.2.1体外抗氧化评价方法简介

1.2.2柑橘果实中黄酮类化合物的抗氧化活性研究进展

1.2.3柑橘果实中酚酸的抗氧化活性研究进展

1.2.4柑橘果实中柠檬苦素的抗氧化活性研究进展

1.3研究目的和意义

1.4研究内容

第二章 不同品种柑橘幼果中功能性成分分析及抗氧化能力研究

2.1引言

2.2材料与方法

2.2.1材料

2.2.2主要试剂与设备

2.2.3 HPLC-PDA同时测定黄烷酮糖苷与多甲氧基黄酮

2.2.4酚酸的提取与测定

2.2.5柠檬苦素类物质的提取与测定

2.2.6辛弗林的提取与测定

2.2.7福林酚法测总酚

2.2.8 FRAP实验测定抗氧化能力

2.2.9 DPPH自由基清除实验测定抗氧化能力

2.2.10 ABTS.+自由基清除实验测定抗氧化能力

2.2.11统计分析方法

2.3结果与分析

2.3.1不同品种柑橘幼果中主要黄酮类物质含量与组成

2.3.2不同品种柑橘幼果中主要酚酸的含量与组成

2.3.3不同品种柑橘幼果中柠檬苦素与诺米林的含量

2.3.4不同品种柑橘幼果中辛弗林的含量

2.3.5不同品种柑橘幼果中总酚含量及其抗氧化能力

2.3.6 FRAP,DPPH，ABTS体系抗氧化能力与总酚(GAE)、总黄酮类物质、可提取酚酸总和、柠檬苦素与诺米林含量总和及辛弗林含量八者间的相关性分析

2.4小结

第三章 不同干燥方式对柑橘幼果中功能性成分含量及抗氧化能力的影响

3.1引言

3.2材料与方法

3.2.1材料

3.2.2主要试剂与设备

3.2.3 HPLC-PDA测定黄烷酮糖苷与多甲氧基黄酮

3.2.4酚酸的提取与测定

3.2.5柠檬苦素类物质的提取与测定

3.2.6辛弗林的提取与测定

3.2.7福林酚法测总酚

3.2.8 FRAP实验测定抗氧化能力

3.2.9 DPPH自由基清除实验测定抗氧化能力

3.2.10 ABTS.+自由基清除实验测定抗氧化能力

3.2.11统计分析方法

3.3结果与分析

3.3.1不同干燥方式对柑橘幼果中黄酮类化合物含量的影响

3.3.2不同干燥方式对柑橘幼果中酚酸含量的影响

3.3.3不同干燥方式对柑橘幼果中柠檬苦素和诺米林含量的影响

3.3.4不同干燥方式对柑橘幼果中辛弗林含量的影响

3.3.5不同干燥方式对柑橘幼果总酚含量及提取液抗氧化能力的影响

3.4讨论

3.4.1不同干燥方式对柑橘幼果中功能性成分和总酚含量影响的原因探讨

3.4.2不同干燥方式对柑橘幼果提取液抗氧化能力影响的原因探讨

3.5小结

第四章 不同温度热风干燥对柑橘幼果功能性成分含量及抗氧化能力的影响

4.1引言

4.2材料与方法

4.2.1材料

4.2.2主要试剂与设备

4.2.3 HPLC-PDA测定黄烷酮糖苷与多甲氧基黄酮

4.2.4酚酸的提取与测定

4.2.5柠檬苦素类物质的提取与测定

4.2.6辛弗林的提取与测定

4.2.7福林酚法测总酚

4.2.8 FRAP实验测定抗氧化能力

4.2.9 DPPH自由基清除实验测定抗氧化能力

4.2.10 ABTS.+自由基清除实验测定抗氧化能力

4.2.11统计分析方法

4.3结果与分析

4.3.1不同温度热风干燥柑橘幼果干燥时间的确定

4.3.2不同温度热风干燥对柑橘幼果中黄酮类化合物含量的影响

4.3.3不同温度热风干燥对柑橘幼果中酚酸含量的影响

4.3.4不同温度热风干燥对柑橘幼果中柠檬苦素和诺米林含量的影响

4.3.5不同温度热风干燥对柑橘幼果中辛弗林含量的影响

4.3.6不同温度热风干燥对柑橘幼果总酚含量及提取液抗氧化能力的影响

4.4讨论

4.4.1不同温度热风干燥对柑橘幼果总酚含量及抗氧化影响的原因探讨

4.5小结

第五章 结论与展望

参考文献

作者简介及攻读硕士学位期间发表或录用的论文