鸭胚蛋白酶解工艺优化及酶解多肽功能性评价

摘要

鸭胚是一种营养价值和营养功效较高的食品。鸭胚不仅具有丰富的营养物质，并且还具有一定功能功效，对人体营养保健有重要作用。以鸭胚为主要原料的保健食品开发前景十分广阔。本研究以鸭胚蛋白为原料经酶水解制得以鸭胚多肽、游离氨基酸为主的水解液，并对酶解多肽进行抗衰老、抗疲劳功效的功能性评价。 首先对鸭胚蛋白最佳酶解工艺进行研究，通过木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶进行单酶酶解，以水解度为标准，筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行复合酶解实验，得出樱桃谷鸭胚蛋白双酶复合酶解最佳工艺参数为：pH值为7.0，温度为51.0℃，加酶量为4101.2U/g，Pa:Tr为1，水解度为39.083％，多肽含量为77.084mg/ml。麻鸭鸭胚蛋白双酶复合酶解最佳工艺参数为：pH值为7.0，温度为51.1℃，加酶量为4125.6U/g，Pa:Tr为1，水解度为41.583％，多肽含量为79.054mg/ml。 将两品种酶解液通过超滤技术截留去滤去大分子蛋白酶、未水解的底物与不溶性肽，此时酶解液的主要成分为小分子的多肽和游离氨基酸。通过凝胶层分析指示分子量的分布可以得知，分子量低于1500的小肽占相当大的部分。 对纯化后两品种的鸭胚蛋白酶解液进行功能性评价。通过空白组，樱桃谷鸭胚酶解液低、中、高剂量组，麻鸭鸭胚酶解液低、中、高剂量组进行动物实验比较。抗疲劳试验结果显示两品种鸭胚酶解液均能够延长小鼠游泳时间，提高运动后LDH活力及HG的储备量；降低血LD和BUN的含量，提高小鼠运动耐力。表明，樱桃谷鸭胚、麻鸭鸭胚酶解液具有增强机体抗疲劳能力，其中，樱桃谷鸭胚酶解液抗疲劳能力较麻鸭强。抗衰老试验结果显示两品种鸭胚酶解液均能加强小鼠血清中SOD活性，降低MDA含量，增强机体有氧代谢的能力，减少体内的自由基。表明，樱桃谷鸭胚麻鸭鸭胚酶解液具有抗衰老能力，其中，樱桃谷鸭胚酶解液抗衰老功能较麻鸭强。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1蛋白质酶解技术的发展现状

1.1.1 酶解的理论研究

1.1.2生物酶的种类与选择

1.1.3酶解技术在食品工业中的应用

1.1.4酶解技术在制药工业中的应用

1.1.5酶解技术的前景

1.2酶解蛋白制备生物活性肽研究进展

1.2.1生物活性肽生理功能

1.2.2酶解蛋白质制备生物活性肽国外研究进展

1.2.3酶解蛋白法制备生物活性肽国内研究进展

1.2.4生物活性肽制取方法

1.3研究目的意义与内容

1.3.1目的意义

1.3.2研究内容

2材料与方法

2.1鸭胚蛋白最优水解工艺研究

2.1.1材料

2.1.2设备

2.1.3工艺流程

2.1.4实验方法

2.1.5试验设计

2.2鸭胚酶解液的纯化及多肽分子量的确定

2.2.1材料与设备

2.2.2试验方法

2.3酶解多肽功能性评价

2.3.1材料与设备

2.3.2受试物

2.3.3试验分组

2.3.2试验方法

3结果与分析

3.1鸭胚蛋白最佳水解工艺研究

3.1.1单酶单因素的确定

3.1.2三种酶的响应面试验

3.3双酶复合工艺研究

3.3.1樱桃谷鸭复合酶解试验

3.3.2麻鸭的复合酶解试验

3.3小结

3.3不同酶解液的比较

3.3.1多肽含量的测定：三氯乙酸法

3.3.2两种鸭胚酶解液的多肽含量的比较

3.3.3凝胶层分析指示分子量的分布

3.4功能性评价结果与分析

3.4.1对小鼠抗疲劳作用的影响

3.4.2对小鼠抗氧化作用的影响

4讨论

4.1创新点：

4.2进一步研究方向

5结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文情况