鸭胚蛋多肽的超滤分离、纯化及其功能性研究

摘要

鸭胚蛋是受精鸭蛋经特殊孵化工艺使胚胎不断发育，具有生命力的鸭蛋，其蛋白质含量高，而且含有“人体胎盘”的某些成分，有改善肠胃功能、抗氧化、抗衰老的作用；此外，胚胎的生长发育过程中可能产生大量的新营养物质，如多肽等，由于小分子量的多肽与大分子量的蛋白质相比可以更好、更快地被人体吸收，因此可以利用鸭胚蛋来开发保健食品，市场前景非常广阔。 本试验以鸭胚蛋为原料，采用超滤技术分离提取鸭胚蛋多肽，确定了适宜超滤工艺条件；对鸭胚蛋多肽进行葡聚糖凝胶Sephadex-G25柱层析纯化；研究了不同分子量段鸭胚蛋多肽的溶解性、起泡及起泡稳定性、乳化及乳化稳定性、体外抗氧化、体内抗氧化、耐缺氧、抗疲劳作用等的功能特性。主要试验结果如下： 1.超滤提取樱桃谷SM3鸭鸭胚蛋多肽时，截流分子量为50000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度35℃，料液本身pH条件下运行30min为一个工作周期；截留分子量为13000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行30min为一个工作周期；截流分子量为10000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行40min为一个工作周期；截留分子量为6000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行60min为一个工作周期；截流分子量为3000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行60min为一个工作周期。 2.超滤提取麻鸭鸭胚蛋多肽时，截流分子量为50000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度35℃，料液本身pH条件下运行20min为一个工作周期；截留分子量为13000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行40min为一个工作周期；截流分子量为10000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行40min为一个工作周期：截留分子量为6000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行60min为一个工作周期；截流分子量为3000Da的超滤膜应在操作压力0.08～0.1Mpa，操作温度<45℃，料液本身pH条件下运行60min为一个工作周期。 3.利用葡聚糖凝胶Sephadex-G25柱层析对不同分子量段的鸭胚蛋多肽超滤液进行了进一步纯化，并进行了理化性质分析，结果显示，两个品种的鸭胚蛋多肽均具有较好的溶解性，起泡及起泡稳定性、乳化及乳化稳定性，体外抗氧化性，通过动物试验显示，两个品种的鸭胚蛋多肽均能影响小鼠的抗氧化、抗疲劳、耐缺氧能力。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1功能肽简介

1.1.2功能肽的分类

1.1.3分离方法

1.1.4应用

1.2超滤技术的研究

1.2.1原理

1.2.2超滤膜装置及类型

1.2.3现状及研究进展

1.2.4影响超滤的几个因素

1.2.5超滤技术的应用

1.3本项目研究的目的意义、技术路线及研究内容

1.3.1本项目研究的目的意义

1.3.2技术路线

1.3.3本项目的研究内容

2材料与方法

2.1原料

2.2材料

2.2.1主要试剂

2.2.2主要仪器设备

2.3实验方法

2.3.1鸭胚蛋多肽含量的测定

2.3.2膜通量的测定

2.3.3葡聚糖凝胶SephadexG-25柱层析

2.3.4溶解性的测定

2.3.5起泡性和起泡稳定性的测定

2.3.6乳化性和乳化稳定性的测定

2.3.7鸭胚蛋多肽的总抗氧化性的测定

2.3.8鸭胚蛋多肽清除超氧阴离子自由基(O2-·)能力的测定

2.3.9多肽对羟基自由基的清除作用

2.4动物试验

2.4.1抗氧化试验作用的研究

2.4.2抗疲劳试验作用的研究

2.4.3耐缺氧试验作用指标的测定

2.5研究方法

2.5.1鸭胚蛋多肽超滤工艺的确定

2.5.2鸭胚蛋多肽的初步分离纯化

2.5.3鸭胚蛋多肽的理化性质

2.5.4鸭胚蛋多肽的动物试验

3结果与分析

3.1超滤法分离鸭胚蛋多肽的工艺研究

3.1.1操作时间对膜通量的影响

3.1.2操作压力对膜通量的影响

3.1.3料液pH值对膜通量的影响

3.1.4料液温度对膜通量的影响

3.2鸭胚蛋多肽的葡聚糖凝胶SephadexG-25柱层析分离纯化

3.2.1樱桃谷SM3型鸭胚蛋多肽的葡聚糖凝胶SephadexG-25柱层析图

3.2.2麻鸭鸭胚蛋多肽的葡聚糖凝SephadexG-25柱层析图

3.3鸭胚蛋多肽的理化性质分析

3.3.1感官评定鸭胚蛋多肽粉的颜色，味道，气味

3.3.2鸭胚蛋多肽液的多肽含量及总抗氧化性

3.3.3鸭胚蛋多肽溶解性的测定

3.3.4鸭胚蛋多肽起泡性及起泡稳定性的测定

3.3.5鸭胚蛋多肽乳化性及乳化稳定性的测定

3.3.6鸭胚蛋多肽清除超氧阴离子自由基(O2-·)能力的测定

3.3.7鸭胚蛋多肽清除羟基自由基能力的测定

3.4鸭胚蛋多肽对小鼠抗氧化、抗疲劳、耐缺氧能力的影响

3.4.1鸭胚蛋多肽对小鼠抗氧化能力的影响

3.4.2对小鼠抗疲劳作用的影响

3.4.3对小鼠耐缺氧能力的影响

4讨论

4.1超滤技术在鸭胚蛋多肽中应用的探讨

4.2鸭胚蛋多肽对小鼠抗疲劳能力的影响

4.3鸭胚蛋多肽对小鼠耐缺氧的影响

4.4鸭胚蛋多肽对小鼠抗氧化的影响

4.5创新点

4.6进一步研究方向

5结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文情况