瑞士乳杆菌H9的发酵特性和降血压效应研究

摘要

本文系统研究了分离自传统发酵酸牦牛奶样品的具有ACE抑制活性益生乳酸菌Lactobacillus helveticus H9的发酵特性和降血压效应。
　　首先比较分析酸、有机溶剂、EDTA和加热等四种酶失活方法对体外ACE抑制活性评价结果的影响，确定了应用加热或加EDTA溶液的方法使ACE失活的具有高稳定性的ACE抑制活性体外评价方法。
　　其次，系统研究了发酵温度、发酵时间、蛋白含量、复配发酵等因素对L.helveticus H9发酵乳的ACE抑制活性、Val-Pro-Pro、Ile-Pro-Pro、游离氨基氮含量、滴定酸度和OD600的影响，并研究了该菌株按不同接种量在牛乳、马乳和豆乳中的发酵和储藏期间的ACE抑制活性、Val-Pro-Pro、Ile-Pro-Pro、游离氨基氮含量、滴定酸度和OD600的变化。研究表明，复配发酵和发酵介质对L. helveticus H9发酵乳的ACE抑制活性具有较大影响。将L. helveticus H9按5×106 CFU/mL接入11％的脱脂乳中，37℃发酵，pH值降至4.3时，其发酵乳ACE抑制活性、Val-Pro-Pro和Ile-Pro-Pro含量分别为76.1±5.6%、3.590±0.371μM和2.280±0.210μM。该菌株发酵马乳和豆乳中不产Val-Pro-Pro和Ile-Pro-Pro，并且ACE抑制率明显低于发酵牛乳。
　　此外，进行了L. helveticus H9在模拟胃肠液中的耐受性和增殖培养基优化的研究。研究发现该菌株在模拟胃液和肠液中具有较好的耐受性和增值能力。该菌株在本文优化增殖培养基中的活菌数比普通MRS提高近35倍。
　　最后，通过血压和靶器官组织镜下观察分析研究、评价了L. helveticus H9发酵乳对高血压（SHR）和正常血压（WKY鼠）的影响。研究表明，该菌株发酵乳对SHR具有起效时间长、不影响血液循环，并对正常血压大鼠（WKY）不产生不利影响，显示了具有较好的体内降血压效应。此外，左心室心肌基因表达模式研究表明，饲喂L. helveticus H9发酵乳后SHR左心室心肌组织细胞的多个与高血压相关基因，例如肌球蛋白轻链激酶、血栓调节蛋白、内皮型一氧化氮合酶等基因的表达发生了显著变化。
　　L. helveticus H9的菌株来源明确，遗传背景清楚，本论文对该菌株的发酵特性和降血压效应进行了系统研究，这些工作为该菌株后续研究和抗高血压功能性发酵乳制品的开发奠定了重要的基础。

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缩 略 语 表

1 引言

1.1 高血压

1.2 血管紧张素转换酶及其调节血压作用

1.3 血管紧张素转换酶抑制肽

1.4 抗高血压功能性乳制品研究

1.5 立题意义与研究内容

2 体外ACE抑制活性测定方法的改良

2.1 材料与方法

2.2 结果与讨论

2.3 小结

3 具有ACE抑制活性L. helveticus H9的复配发酵菌种的筛选

3.1 材料与方法

3.2 结果与讨论

3.3 小结

4 L. helveticus H9在牛乳、马乳和豆乳中的发酵特性研究

4.1 材料与方法

4.2 结果与讨论

4.3 小结

5 发酵条件对L. helveticus H9发酵乳的影响

5.1 材料与方法

5.2 结果与讨论

5.3 小结

6 L. helveticus H9的增殖培养基优化和模拟胃肠液中稳定性研究

6.1 材料与方法

6.2 结果与分析

6.3 小结

7 L. helveticus H9发酵乳体内降血压效应研究

7.1 材料与方法

7.2 结果与讨论

7.3 小结

8 结论

致谢

参考文献

附录

作 者 简 介