红曲霉荞麦的固态发酵及其产物降血脂作用的研究

摘要

目的：以荞麦为固态发酵基质，Monacolin K为指标，考察红曲霉FK-01的固态发酵工艺；探讨荞麦红曲中Monacolin K的提取工艺；考察红曲霉荞麦固态发酵产物对实验性高脂血症小鼠血脂及体重的影响。
　　方法：通过单因素试验，初步考察了初始含水量、pH值、装料量、接种量、种龄、补水方式、培养时间和培养温度8个因素对红曲霉荞麦固态发酵产 Monacolin K的影响。在单因素试验的基础上，选择初始含水量、装料量、接种量和培养时间四个因素进行正交试验设计。然后对附加碳、氮源，无机盐的种类及含量进行了考察。在Monacolin K提取工艺的试验中，以Monacolin K得率为指标，首先对影响Monacolin K得率的各工艺参数进行了探讨，在此基础上，使用正交试验优选了工艺参数。最后对固态发酵产物的降血脂药理作用进行了研究：通过高脂高胆固醇饲料喂养两周，建立实验性高脂血症小鼠模型，同时灌胃给予荞麦红曲粉小(300 mg/ kg)、中(600 mg/ kg)、大(1200 mg/ kg)三个剂量，测定荞麦红曲对血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。
　　结果：红曲霉荞麦固态发酵产Monacolin K的最佳工艺条件为：150mL三角瓶装15 g荞麦米，并调整初始含水量为70％，初始pH为2.0，补水方式为每次补10%，共计4次，添加4%可溶性淀粉、0.2% NH4NO3、1%酵母膏、0.3% KH2PO4、0.2% MgSO4，接种10%种龄为48 h的种子液，培养温度为26℃，静置培养17天。荞麦红曲中Monacolin K的适宜提取条件为：以65%乙醇为提取溶剂，料液比1:20，提取温度70℃，提取时间3 h。在高脂饲料所致实验性高脂血症小鼠模型中，荞麦红曲中、大剂量组能显著降低高脂血症小鼠的TG、TC和 LDL-C，并可显著升高 HDL-C；荞麦红曲小剂量组能显著降低高脂血症小鼠的TG和 LDL-C，对 TC和 HDL-C也有一定影响。
　　结论：1.培养条件对红曲霉的生长及Monacolin K的产量有很大的影响。在优化的条件下，固态发酵产物中Monacolin K的含量最高可达2.8 mg/ g。2.采取的提取方法操作简单，提取时间短，提取效率高，为荞麦红曲中Monacolin K的提取和含量测定提供了一种既简易可行又经济有效的方法。3.红曲霉荞麦固态发酵产物能显著降低实验性高脂血症小鼠的血脂含量，对高脂血症的发生具有一定的预防作用，因此研究和开发荞麦红曲保健食品及药品具有一定的价值。

目录

声明

第一章 绪 论

第二章红曲霉荞麦固态发酵产Monacolin K发酵工艺的研究

2.1 实验材料

2.1.1 菌株

2.1.2 红曲样品

2.1.3 试剂

2.1.4 实验仪器

2.1.5 实验用培养基

2.2 实验方法

2.2.1 菌株的活化

2.2.2 种子斜面培养

2.2.3 摇瓶种子液的制备

2.2.4 固态发酵培养

2.2.5 红曲霉荞麦固态发酵的一般工艺流程

2.2.6 Monacolin K的含量测定

2.3 结果与讨论

2.3.1初始含水量对Monacolin K产量的影响

2.3.2初始pH对Monacolin K产量的影响

2.3.3装料量对Monacolin K产量的影响

2.3.4接种量对Monacolin K产量的影响

2.3.5种龄对Monacolin K产量的影响

2.3.6补水方式对Monacolin K产量的影响

2.3.7培养时间对Monacolin K产量的影响

2.3.8温度对Monacolin K产量的影响

2.3.9 发酵条件正交试验

2.3.10附加碳源对Monacolin K产量的影响

2.3.11附加氮碳对Monacolin K产量的影响

2.3.12添加无机盐对Monacolin K产量的影响

第三章荞麦红曲中Monacolin K提取工艺的研究

3.1 材料与方法

3.1.1 材料

3.1.2 实验方法

3.2 结果与分析

3.2.1薄层色谱法对荞麦红曲中Monacolin K的定性结果与分析

3.2.2 红曲色素的浸出试验结果与分析

3.2.3荞麦红曲中Monacolin K的提取工艺结果与分析

3.3 讨论

第四章 荞麦红曲对实验性高脂血症小鼠降脂作用的研究

4.1 材料与仪器

4.1.1 药品与试剂

4.1.2 试验动物

4.1.3 试验仪器

4.2 实验方法

4.2.1 试验动物分组及处理

4.2.2 测定指标及方法

4.2.3 数据处理

4.3 结果

4.3.1 荞麦红曲粉对小鼠体重的影响

4.3.2 荞麦红曲粉对小鼠血脂水平的影响

4.4 讨论

第五章 结 论

参考文献

致谢

综述:红曲霉代谢产物的研究进展