C101基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及相关机理的研究

摘要

研究背景:肺癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,肺癌的发生发展与多个基因的异常有关,其中抑癌基因的异常变化引人关注。在6q23-25存在一个主要的肺癌易感基因簇;在前期的实验中我们用抑制性削减杂交的方法克隆了一个在化疗药物敏感细胞中高表达的基因 C101。该基因是一个位于6q23-25的候选抑癌基因,功能不详。为研究其功能,我们观察了C101基因导入人肺腺癌裸鼠移植瘤后对肿瘤生长的影响并初步探讨其作用机理。
　　方法:构建并制备C101基因真核表达载体;Western blot筛选C101基因表达偏低的肺腺癌细胞株,并进行了裸鼠荷瘤实验;将C101基因与脂质体共注入人肺腺癌裸鼠移植瘤内并测量肿瘤大小;用HE染色、免疫组化、TUNEL染色、Western blot来初步探讨C101基因引起人肺腺癌裸鼠移植瘤生长抑制的机理。结果:构建了C101基因真核表达载体;将C101基因导入人肺腺癌裸鼠移植瘤后肿瘤体积明显小于对照组(P=0.002,0.021)。进一步研究表明, C101基因的表达上调了Caspase3、PARP、Smac和TRAIL,下调了VEGF和EGFR。
　　结论:成功构建C101基因真核表达载体;新候选抑癌基因即C101基因能抑制人肺腺癌裸鼠移植瘤生长,其抑制作用与C101基因诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管生成因子的表达相关;这为寻找肺癌基因治疗新靶标提供了理论和实验依据。

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前言

材料与方法

1. 实验材料

2. 实验方法

3. 技术路线

结果

1 pcDNA3.1-C101真核表达载体的构建、鉴定及大量提取

2 目的细胞株的筛选

3 C101基因在裸鼠移植瘤内的表达

4 C101基因对裸鼠移植瘤的生长抑制作用

5 C101基因表达诱导肿瘤细胞凋亡

6 C101基因表达抑制肿瘤血管形成

讨论

结论

参考文献

前进中的肿瘤基因治疗

致谢