HIF-1α基因沉默对人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤生长及Survivin表达的影响

摘要

目的：在体观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因沉默对肺癌的抑瘤效应和survivin表达的影响。方法：将实验用肺腺癌A549细胞分为空白对照组、无意义序列转染组和实验组(稳定转染HIF-lα-MiRNA的真核表达载体)，接种裸鼠，建立裸鼠荷瘤模型，观测HIF-1α-MiRNA对裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用和对survivin表达的影响。采用免疫组化SP法检测HIF-1α和survivin蛋白在裸鼠移植瘤中的表达。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1α和survivin mRNA的表达。采用原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤组织中细胞凋亡。结果：实验组裸鼠肿瘤的生长速度较空白对照组、无意义序列转染组明显减慢(P<0.05)。接种60d后处死裸鼠，实验组裸鼠的肿瘤重量为(0.59±0.28)g，明显轻于空白对照组[(1.90±0.18)g]和无意义序列转染组[(1.66±0.24)g, P<0.O1]。实验组肿瘤组织中HIF-1α mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.45±0.04和(24.56±5.83)%, survivin mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.32±0.02和(29.08±3.99) %，均明显低于空白对照组、无意义序列转染组(均P<0.05)。但实验组肿瘤组织中凋亡细胞的数量显著高于对照组。结论：以HIF-1a为靶点的基因治疗，可能通过下调靶基因survivin的表达促进肺癌细胞凋亡，发挥抑制肿瘤生长的作用。