动物性食品中氯苯胍和左旋咪唑残留检测方法研究

摘要

氯苯胍为一种抗原虫药,主要作用于畜禽球虫病,其添加于饲料中,对鸡、兔急性、慢性球虫病有较好的疗效。左旋咪唑为咪唑并噻唑类广谱驱虫药,对多种动物的胃肠道线虫及幼虫均有高效。但在兽医临床中不正确使用氯苯胍及左旋咪唑就会造成该药物在动物性食品中残留,危害人类的身体健康。
　　本研究是以外标法为定量手段,分别建立了氯苯胍在鸡、兔组织中的残留检测方法和左旋咪唑在猪、鸡组织中的残留检测方法。方法一是建立动物在鸡、兔组织中氯苯胍残留检测的HPLC法。组织试样经乙酸乙酯提取,离心,上清液减压旋转蒸干,用正己烷溶解后过弗罗里硅土固相萃取柱净化,10％丙酮的甲醇溶液洗脱后,蒸干,甲醇定容,用高效液相色谱仪(带紫外检测器)在353nm波长处测定,外标法定量。在此条件下,氯苯胍的保留时间为5min左右。氯苯胍浓度在5—500μg/L时,与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=0.00715x+1.386(r=0.9999)。结果表明,氯苯胍在组织中的检出限5μg/kg,定量限10μg/kg。在分别10、20、50、100μg/kg加标水平下,平均回收率在70％-105％之间,批内变异系数在15％以内,批间变异系数在20％以内。方法二是建立动物在猪、鸡组织中左旋咪唑残留检测的HPLC法。组织试样在碱性条件下先用乙酸乙酯提取,然后用0.1mol/L盐酸反萃取,萃取的样液用混合型阳离子固相萃取小柱净化,用氨化甲醇洗脱,洗脱液氮气吹干,流动相定容,用高效液相色谱仪(带紫外检测器)在220nm波长处测定,外标法定量。在此条件下,左旋咪唑的保留时间为12-13min。左旋咪唑浓度在10-1000μg/L时,与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=196.37x+81.599(r=0.9999)。结果表明,左旋咪唑在组织中的检出限2μg/kg,定量限5μg/kg。在不同加标水平(5、10、20μg/kg)下,平均回收率在70％-110％之间,批内变异系数在10％以内,批间变异系数在15％以内。本课题的检测方法样品处理简单,其各项方法性能指标均符合兽药残留检测方法的要求。通过对氯苯胍和左旋咪唑两个残留检测方法的建立,为残留监控提供了技术保障,对保障人类健康,具有十分重要的意义和实用价值。

目录

摘要

ABSTRACT

缩略语

1 前言

1.1 药理作用

1.2 最高残留限量和休药期

1.3 建立残留检测方法的意义

1.4 国内外相关残留分析方法

1.5 研究内容和目的意义

2 氯苯胍残留检测方法的建立

2.1 材料与方法

2.1.1 药物与标准品

2.1.2 主要试剂及溶液

2.1.3 主要仪器设备

2.1.4 样品的采集和保存

2.1.5 主要色谱条件

2.2 检测方法建立

2.2.1 标准曲线制备

2.2.2 样品制备和分析测定

2.2.3 最低检测限和最低定量限

2.2.4 回收率测定

2.2.5 变异系数测定

2.3 结果

2.3.1 鸡、兔的肌肉、肝脏、和肾脏组织中各添加4种不同浓度水平的盐酸氯苯胍的批内和批间变异系数见表

2.3.2 标准曲线和线性范围

2.3.3 最低检测限和最低定量限

2.3.4 准确度和精密度

2.4 讨论

2.5 结论

2.6 应用

3 左旋咪唑残留检测方法建立

3.1 材料与方法

3.1.1 药物与标准品

3.1.2 主要试剂及溶液

3.1.3 主要仪器设备

3.1.4 样品的采集和保存

3.1.5 主要色谱条件

3.2 检测方法建立

3.2.1 标准曲线制备

3.2.2 样品制备和分析测定

3.2.3 最低检测限和最低定量限

3.2.4 回收率测定

3.2.5 变异系数测定

3.3 结果

3.4 讨论

3.5 结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的论文