柿叶多糖的提取分离及其一级结构表征

摘要

我国柿叶资源丰富，柿叶的药用价值较高，在中国古代就被做为药品使用。柿叶多糖(PPS)是柿叶的主要功能成分之一，有关柿叶多糖的研究还处于初级阶段，本文结合柿叶多糖的抗氧化活性研究了柿叶多糖的最优提取条件，分析了分离纯化后的柿叶多糖一级结构特征，为柿叶多糖高级结构及活性的研究提供理论基础，研究结果如下:
　　柿叶经过粉碎后用热水提取，得到柿叶粗多糖的水溶液，95％乙醇沉淀得到柿叶粗多糖。通过单因素和正交实验确定了提取因素对柿叶多糖得率影响大小为:pH＞温度＞时间＞料液比，各个因素均有极显著性差异。其最佳提取工艺参数为提取温度60℃、提取时间2h、料液比1∶30、pH=7，此最优工艺条件下粗多糖得率可达4.6％。
　　将提取出的柿叶粗多糖复溶后运用sevag法脱蛋白，过氧化氢脱色，运用DEAE-52纤维素柱层析进行分离纯化，分别使用超纯水、0.1、0.2、0.5mol/LNaCl洗脱，得到4个柿叶多糖级分:PPS-1、PPS-2、PPS-3、PPS-4，得率分别为5.1％、38.1％、11.2％、4.5％。红外光谱和紫外光谱结果显示柿叶多糖可能是一种含有糖醛酸的糖蛋白。运用糖腈乙酸脂衍生化法对PPS-1、PPS-2、PPS-3、PPS-4进行GC分析，结果表明4个级分组成基本相似，主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成。运用PMP衍生化法对PPS-1、PPS-2、PPS-3、PPS-4进行HPLC分析，结果表明PPS-1的单糖组成比例为:葡萄糖醛酸∶葡萄糖∶木糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=0.41∶1.49∶5.23∶1∶0.56;PPS-2的单糖组成比例为:鼠李糖∶葡萄糖醛酸∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶木糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=0.14∶0.21∶0.22∶0.19∶0.68∶1∶0.47;PPS-3的单糖组成比例为:鼠李糖∶葡萄糖醛酸∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶木糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=0.21∶0.28∶2.01∶2.30∶1∶0.45lPPS-4的单糖组成比例为:鼠李糖∶葡萄糖醛酸∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶木糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=0.16∶0.22∶0.55∶0.28∶3.58∶1∶0.59。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 柿叶研究进展

1．1．1 概述

1．1．2 柿叶的开发利用现状

1．1．3 柿叶活性成分的研究现状

1．2 植物多糖的研究现状

1．2．1 植物多糖的药理作用

1．2．2 植物多糖的提取

1．2．3 多糖的分离纯化工艺

1．2．4 多糖的结构鉴定

1．3 课题研究的主要内容

第二章 柿叶多糖的提取工艺研究

2．1 实验材料与仪器

2．1．1 实验材料

2．1．2 实验仪器

2．2 实验方法

2．2．1 柿叶粗多糖的提取方法

2．2．2 柿叶多糖提取单因素设计

2．2．3 柿叶多糖提取正交实验设计

2．2．4 柿叶多糖基本指标分析

2．2．5 数据处理方法

2．3 结果与分析

2．3．1 单因素实验

2．3．2 正交实验

2．4 本章小结

第三章 柿叶多糖的分离纯化及其一级结构表征

3．1 引言

3．2 实验试剂及仪器

3．2．1 实验试剂

3．2．1 实验仪器

3．3 实验方法

3．3．1 柿叶多糖的分离纯化方法

3．3．2 柿叶多糖的红外光谱分析

3．3．3 柿叶多糖的紫外光谱分析

3．3．4 气相色谱法(GC)测定柿叶多糖单糖组成

3．3．5 高效液相色谱法(HPLC)测定柿叶多糖单糖组成

3．3．6 数据分析处理

3．4 结果与分析

3．4．1 柿叶多糖的红外光谱

3．4．2 柿叶多糖的紫外光谱

3．4．3 柿叶多糖的糖腈乙酸脂衍生物GC分析

3．4．4 柿叶多糖的衍生物HPLC分析

3．5 小结

第四章 结论与展望

4．1 结论与讨论

4．2 展望

参考文献

致谢