LIPC、CETP基因常见单核苷酸多态性与妊娠期高血压疾病的相关性研究

摘要

目的：
　　本课题拟在探讨LIPC基因-250G/A(rs2070895)、-514C/T(rs1800588)多态和CETP基因TaqIB(rs708272)多态是否是妊娠期高血压疾病的易感位点；这3个多态是否影响妊娠期高血压疾病的脂代谢水平。
　　方法：
　　1.按照纳入和排除标准，收集福建省汉族人群外周血标本652例（妊娠期高血压疾病患者321例，正常孕妇331例），2ml/例。收集上述人群的治疗前全套血脂检测结果以及其他有关临床资料。
　　2. NCBI公共数据库SNP database中搜索LIPC基因-250G/A、-514C/T多态和CETP基因TaqIB多态的DNA序列资料。
　　3.从外周血中提取基因组DNA；设计并合成3对PCR反应所需的引物；PCR扩增包含这3个SNPs的基因片段。
　　4. RFLP法检测PCR扩增片段中的SNPs，计算等位基因频率和基因型频率。
　　5.用SPSS13.0软件统计分析各SNP与各血脂指标的相关性。
　　6.运用SHEsis软件对LIPC基因的不同多态位点进行连锁不平衡及单倍型分析。
　　结果：
　　1．在所研究的3个SNPs位点中有两个（-250G/A、-514C/T）符合Hardy-Weinberg平衡；另外一个（TaqIB）在妊娠期高血压疾病组偏离Hardy-Weinberg平衡（P＜0.05）。
　　2．三个多态（-250G/A、-514C/T、TaqIB）的等位基因频率如下：
　　-250G/A多态G等位基因在在妊娠期高血压疾病组和对照组中的分布频率分别为0.609、0.603，A等位基因为0.391、0.397；
　　-514C/T多态C等位基因在在妊娠期高血压疾病组和对照组中的分布频率分别为0.632、0.622，T等位基因为0.368、0.378；
　　TaqIB多态B1等位基因在在妊娠期高血压疾病组和对照组中的分布频率分别为0.583、0.606，B2等位基因为0.417、0.397。
　　3．在妊娠期高血压疾病组中，TG、TC、ApoA1、ApoB、HDL-C、BMI、SBP、DBP水平在三个多态（-250G/A、-514C/T、TaqIB）位点的不同基因型间差异无统计学意义（P＞0.05）。对妊娠期高血压疾病各亚组的研究发现：子痫前期重度孕妇TG、TC水平在TaqIB多态不同基因型间差异有显著性（F=3.45，P=0.03；F=3.76，P=0.02）；子痫前期轻度孕妇BMI水平在-250G/A多态不同基因型间差异有显著性（F=5.01，P=0.01）；妊娠期高血压孕妇TC、SBP水平在-250G/A多态不同基因型间差异有显著性（F=9.75，P＜0.001；F=3.68，P=0.03），在-514C/T多态不同基因型间差异也有显著性（F=10.58，P＜0.001；F=5.21，P=0.009）。
　　4．正常对照组中，经ANOVA检验，HDL-C水平在-250G＞A多态3组基因型间有显著性差异（F=3.22，P=0.04），AA基因型的HDL-C水平最高；TG、TC、ApoB水平在TaqIB多态3组基因型间有显著性差异（F=4.77，P=0.009；F=3.85, P=0.02；F=3.20，P=0.04），B2B2基因型的TG、TC、ApoB水平最高。
　　5.经二分类非条件logistic回归分析，校正其它混杂因素产生的影响后，BMI、血脂(TG、ApoA1、HDL-C)与妊娠高血压疾病的发病显著相关(P均＜0.05)。
　　6．妊娠期高血压疾病组LIPC基因启动子区的两个多态位点-250G/A、-514C/T的连锁不平衡分析显示，两位点存在强的连锁不平衡（D’=0.98，r2=0.87）。
　　7．对由两个多态位点-250G/A、-514C/T位点组成的单倍型分析显示：4种单倍型均有出现，Hap*2和Hap*3的频率约占97％，这两种单倍型的分布在妊娠期高血压疾病组和对照组间差异均无统计学意义（P＞0.05）。
　　结论：
　　LIPC-250G/A(rs2070895)、-514C/T(rs1800588)及CETP TaqIB(rs708272)多态与妊娠期高血压疾病的发生无明显相关；
　　LIPC基因2个SNP多态性（-250G/A、-514C/T）与GH患者的TC、SBP水平显著相关，提示-250A、-514T是GH患者TC、SBP升高的危险因子；-250G/A与MPE患者的BMI水平显著相关，提示-250AA基因型是MPE患者孕期体重超重的危险基因型；CETP基因TaqIB多态与SPE患者TG、TC水平显著相关，提示B2 B2基因型是SPE患者TG、TC升高的危险基因型。

目录

封面

声明

目录

中英文缩略词表(Abbre via tio ns )

中文摘要

英文摘要

1. 前 言

2. 材料与方法

2.1 研究对象

2.2实验仪器及试剂

2.3实验分析方法

2.4统计学分析

3. 结 果

3. 1 3种基因多态PCR产物的RFLP分析

3.2 研究对象临床资料分析见表2。

3.3 3种基因多态在HDCP和对照组中基因型频率及等位基因频率分布

3.4 3种多态的不同基因型与血脂水平及其它临床指征的关联分析

3.5 妊娠期高血压疾病的可能影响因素的Logis tic回归分析

3.5 LIPC基因中的两个多态位点连锁不平衡和单倍型分析

4. 讨 论

4.1 LIPC和CETP基因的等位基因频率分析

4.2 HDCP组与正常对照组脂代谢的关联分析

4.3 LIPC和CETP基因中的多态位点的不同基因型与血脂的关联

4.4 LIPC基因中的两个多态位点的连锁不平衡和单倍型分析

5．结 论

展望

参考文献

致谢

综述

参考文献