HLA-B*5801等位基因检测方法的建立以及与别嘌呤醇诱发重症药疹的相关性研究

摘要

目的：建立一种简单易操作的HLA-B*5801检测方法,并且调查中国大陆人群中HLA-B*5801等位基因与别嘌呤醇诱发的SCAR的关联性,评估HLA-B*5801作为别嘌呤醇诱发SCAR危险性预测指标的临床价值.rn 方法：在多态性位点密集区域设计一对序列特异性引物,对HLA-B基因座进行初步筛查,另采用多重探针对扩增子内的特定位点作进一步筛选.收集48例服用别嘌呤醇后3个月内出现SCAR患者的DNA,133例服用别嘌呤醇3个月后未出现SCAR的别嘌呤醇耐受患者的DNA,以及280例健康者DNA作为对照.以进口PCR-SSP商品化试剂盒为参照,对新建立方法的准确性进行验证.rn 结果：本研究中自行设计的方法利用中国人群常见HLA-B等位基因分布的规律,将检测方法进行简化,实现了在单管中扩增即可分辨出HLA-B*5801等位基因的目的,且扩增结果以荧光曲线的方式呈现,避免了HLA检测中常用的电泳法易引起污染的问题.本方法的检测结果与商品化试剂盒完全一致,且灵敏度高于电泳检测.在48例服用别嘌呤醇后出现SCAR的患者样本中有45例携带HLA-B*5801等位基因(93.8％),而280例健康对照者中仅有34例携带(12.1％),两者具有显著差异(P＜0.0001,OR108.5,95％CI33.7-346.3),HLA-B*5801检测结果阴性的患者服用别嘌呤醇后发生SCAR的概率显著降低;133例别嘌呤醇耐受样本中也仅10例携带HLA-B*5801(7.5％),与对照组相比无显著差异(P=0.1547,OR0.6,95％CI0.3-1.2).rn 结论：本课题自行设计的方法操作简便,结果易于判断,适用于临床检测HLA-B*5801.在93.8％服用别嘌呤醇后出现SCAR患者中发现HLA-B*5801等位基因,出现频率远高于健康人群的12.1％,可见HLA-B*5801人群服用别嘌呤醇后更易诱发SCAR,说明HLA-B*5801可作为别嘌呤醇服用患者特异性的服药前预测指标,可以指导高尿酸患者对降尿酸药物的选择.