一种产磷脂酶C的重组大肠杆菌及制备磷脂酶C的方法和应用

摘要

本发明公开了一种产磷脂酶C的重组大肠杆菌及制备磷脂酶C的方法和应用，其步骤为：A、磷脂酶C基因的制备：PCR引物的设计及磷脂酶C基因片段的扩增。B、重组质粒的构建：经EcoR？I和Not？I酶切得大小为1158bp的磷脂酶C基因片段，将其克隆到高拷贝质粒pET28a上，得到重组质粒pET28a-P.f-PLC；C、工程菌的构建：用转化方法将质粒pET28a-P.f-PLC导入到E.coil？BL21(DE3)。液体发酵能产生有活力的磷脂酶C，胞内外酶活力可达408.5U/ml。在油脂精炼、磷脂改性、医疗等领域具有一定的应用前景。