基于荧光定量PCR技术定量检测大肠杆菌O157:H7的方法

摘要

本发明提供基于荧光定量PCR技术定量检测大肠杆菌O157:H7的方法，该方法包括：(1)提取样本的微生物基因组DNA；(2)将所述基因组DNA放入PCR反应管中，并向管中加入正向引物、反向引物、SYBR Green Reaction Mix、ROX和无菌水，对标准对照液和待测样品同时进行PCR扩增和熔解曲线测定，获得大肠杆菌O157:H7实时定量PCR的Ct值，根据标准对照液的Ct值和拷贝数拟合的标准曲线，即可定量检测大肠杆菌O157:H7。本发明稳定性良好、灵敏度高、特异性强，与土壤和粪便中的其他细菌无交叉反应，能够在1.5小时之内对土壤和畜禽粪便中大肠杆菌O157:H7进行定量检测。