一种枸杞糖肽辅助降血压口服液及其制备方法

摘要

本发明公开了一种枸杞糖肽辅助降血压口服液及其制备方法，属于枸杞糖肽生物活性物质提取及产品制备技术领域。由以下质量份数的原料混合制成：枸杞糖肽20～60份、覆盆子果浆500～1000份，低聚果糖20～50份，具体制备方法如下：利用去离子水为溶剂，通过超声辅助法提取枸杞糖肽粗提物，采用无机陶瓷膜对所得枸杞糖肽粗提物进行分离纯化；将经纯化后的枸杞糖肽与覆盆子果浆、低聚果糖复配混合，经包装、灭菌后，得到一种具有降血压功效的口服液，该制备方法工艺简单，生产成本低，可制得风味、口感和功效都较好的新型枸杞糖肽辅助降血压口服液。

说明书

技术领域

本发明属于枸杞糖肽生物活性物质提取及产品制备技术领域，尤其涉及一种基于枸杞糖肽辅助降血压口服液及其制备方法。

背景技术

枸杞糖肽作为枸杞果肉中最有效的活性成分，是枸杞的精华所在。现代药理学试验已充分证实，枸杞糖肽能显著提高机体免疫功能、参与生物体的免疫调节、参与生命细胞的各种活动，具有一定的降血压、降血糖、降血脂、抗炎症、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等功效。而枸杞糖肽的高生物活性，使它要比目前临床上常用的口服多糖的免疫活性强几百倍。实验也进一步证明，枸杞糖肽具有抗氧化、抗衰老、调节免疫、抑制肿瘤细胞复制等多种药理活性。

作为一种糖蛋白，糖肽是构成血管壁细胞的重要营养物质来源，也是心脑血管疾病的血液清洗机，对心肌细胞具有营养构建作用，对心脑血管病引发的三高症、冠心病、血管粥样硬化等疾病也有显著预防效果。枸杞糖肽可通过调节血压中枢抑制血管收缩，扩张血管，促进血液循环，清除血液中的垃圾，防止粥样斑块和血栓的形成。同时还可以缩小斑块和溶解血栓，活化和保护血管内皮细胞，改善和增加血管弹性等，从而全面有效的调控血压、血脂，使血液清净，血流畅通，血管收缩自由，血压平稳，从而有效防止一系列心脑血管疾病的发生，且枸杞糖肽是纯天然成分，无任何不良副作用。

目前我国高血压人群数量逐步提升，临床使用的中、西药种类也非常多，但大部分都需要多种药物联合治疗，单一药物治疗难以控制血压，“是药三分毒”，联合治疗的多药物常会伴随较为严重的不良反应给患者造成难以忍受的苦楚。特别是针对肝肾有问题的高血压病人，降压药物会影响肝肾的代谢，为了继续维持血压平衡，则必须辅以具有降血压功能的食品。现如今市面上出售的各类辅助降血压的产品数量极多，大部分都声称具备降血压、降血脂等复合功能，功能指向性不明确。并且市售的降血压的口服液种类不多，且大部分采用的是中药成分，气味清苦，口感不好。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种枸杞糖肽降血液口服液及其制备方法，由药食两用的枸杞糖肽粉为原料，辅以覆盆子果浆和果葡糖浆，具有辅助降血压的同时也具有良好的口感，并且所用原料皆为植物性来源，无任何毒副作用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种枸杞糖肽辅助降血压口服液，由以下质量份数的原料制成：枸杞糖肽20～60份、覆盆子果浆500～1000份，低聚果糖20～50份。

本发明还提供一种枸杞糖肽辅助降血压口服液的制备方法，制备步骤如下：

S1通过超声辅助法提取枸杞糖肽粗提物，将枸杞糖肽粗提物进行过滤，收集滤液，冷冻干燥，得到枸杞糖肽；

S2将枸杞糖肽、覆盆子原浆和低聚果糖混合得到枸杞糖肽辅助降血压口服液。

进一步的，步骤S1中，采用超声微波萃取仪进行超声辅助法提取，提取功率为100W～200W，提取温度为40℃～80℃，提取时间为30min～120min。

进一步的，步骤S1中，采用无机陶瓷膜设备对枸杞糖肽粗提物进行过滤。

进一步的，所述无机陶瓷膜设备的陶瓷膜孔径为0.1μm～0.3μm，操作压力为0.1MPa～0.3MPa，温度为25℃～55℃，稀释倍数为2～5倍。

进一步的，步骤S1中，提取枸杞糖肽粗提物的具体步骤为：取枸杞果干粉碎得到枸杞粉，以水为溶剂，通过超声辅助法提取枸杞糖肽，得到枸杞糖肽粗提物。

进一步的，将含水量为8％～15％的枸杞果干通过高速万能粉碎机粉碎，过40～100目筛。

进一步的，所述提取用水采用去离子水，枸杞粉和去离子水的质量比为1:(3～5)。

进一步的，步骤S2中，覆盆子果浆制作工艺为：将新鲜的覆盆子榨汁，加入0.3～2份的果胶酶，45℃～55℃酶解1h～2h后，在70℃～90℃条件下加热0.3h～0.5h灭酶，冷却后，过60～100目筛，得到覆盆子原浆。

进一步的，步骤S2中，得到的枸杞糖肽辅助降血压口服液采用洁净玻璃容器进行包装，包装好后在65℃～90℃灭菌0.1h～0.5h，灭菌后放入冰水混合物中，降温至常温，避光保存。

与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果：

本发明提供的一种枸杞糖肽辅助降血压口服液，由植物原料覆盆子和低聚果糖配以药食同源的枸杞糖肽所制得，原材料品质优良，该口服液完全采用纯植物原料，可以获得风味、口感较好的口服液，其中包含的枸杞糖肽具有降血压、防止血管壁粥样硬化、心脑血管脆化破裂等心脑血管疾病的功能；覆盆子富含丰富的水杨酸能够有效地保护心脏，预防高血压；低聚果糖具有低热值抗龋齿、促进双歧杆菌增殖、降血糖、改善血清脂质、促进微量元素吸收等优良生理功能，并且拥有良好的甜味特性，本发明的口服液将上述三种原料保健功能于一身，可以达到有效地调控血压的目的。

本发明采用陶瓷膜对枸杞糖肽粗提物进行过滤，替代了传统工艺的醇沉的方法，减少了乙醇的用量，降低了生产成本，避免了枸杞糖肽在乙醇的作用下变性，保证了枸杞糖肽的生物活性，还除去了水溶性黄酮苷、色素、寡糖以及小分子多糖，增加了单位质量的枸杞糖肽的含量可以获得生物活性高、纯度高的枸杞糖肽。

本发明采用超声波辅助处理提取枸杞糖肽，可以大幅度提高枸杞糖肽的提取效率，减少提取时间，降低有机溶剂的消耗，工艺简单易操作。

本发明提供的一种枸杞糖肽辅助降血压口服液的制备方法，采用超声水提的方法提取枸杞糖肽以及陶瓷膜分离枸杞糖肽。在超声提取功率为100～200W时，超声的空化作用、热效应等作用强，从而加快物料细胞壁的破碎，促进糖肽的溶出，增大其提取率；提取温度为50～80℃，较高温度使得糖肽中分子运动加快，分子间相互碰撞的概率增加，促进了扩散作用，有利于产物溶解出来。本发明采用的无机陶瓷膜化学稳定性好、渗透通量大、分离效率高、孔径分布窄、抗污染能力强、耐高温耐腐蚀，可以分离纯化得到不含杂质、纯度高、质量好的枸杞糖肽。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

实施例1

一种枸杞糖肽辅助降血压口服液的制备方法，该方法包括以下步骤：

1、称量枸杞干果原料，枸杞干果原料中水分含量为8％，枸杞干果通过高速万能粉碎机粉碎，过40目筛，备用。

2、取粉碎并烘干后的枸杞粉，以去离子水为溶剂，枸杞粉与水的质量比为1:3，通过超声微波萃取仪在提取功率为125W，提取温度为50℃，提取时间为50min时提取枸杞糖肽，得到枸杞糖肽粗提物。

3、称取一定量枸杞糖肽粗提物，置入无机陶瓷膜设备中，经离心泵循环打入膜组件中进行过滤，透过液经膜组件流出，截留液回到物料槽中，流速与压力由阀门控制。采用无机陶瓷膜设备分离纯化枸杞糖肽粗提物，其陶瓷膜孔径0.1μm。陶瓷膜分离枸杞糖肽的工艺条件为：操作压力为0.1MPa，温度为25℃，稀释倍数为2倍。分离纯化后进行真空冷冻干燥，得枸杞糖肽粉。

4、覆盆子果浆的制备：将新鲜的覆盆子榨汁，加入0.5份的果胶酶，45℃酶解1h后，在70℃条件下加热0.3h灭酶，冷却后，过70目筛，得到覆盆子原浆。

5、以质量份数计，将30份枸杞糖肽，500份覆盆子果浆，20份低聚果糖混合，得到枸杞糖肽辅助降血压口服液。

6、将枸杞糖肽辅助降血压口服液，封装到的洁净玻璃容器中，并遮光保藏，将包装好的产品，放入到65℃水浴锅中0.5h进行灭菌，灭菌后迅速放入冰水混合物中，直到口服液的温度降到常温。

实施例2

一种枸杞糖肽辅助降血压口服液的制备方法，该方法包括以下步骤：

1、称量枸杞干果原料，枸杞干果原料中水分含量为9.50％，枸杞干果通过高速万能粉碎机粉碎，过80目筛，备用。

2、取粉碎并烘干后的枸杞粉，以去离子水为溶剂，枸杞粉与水的质量比为1:4，通过超声微波萃取仪在提取功率为150W，提取温度为60℃，提取时间为80min时提取枸杞糖肽，得到枸杞糖肽粗提物。

3、称取一定量枸杞糖肽粗提物，置入无机陶瓷膜设备中，经离心泵循环打入膜组件中进行过滤，透过液经膜组件流出，截留液回到物料槽中，流速与压力由阀门控制。采用无机陶瓷膜设备分离纯化枸杞糖肽粗提物，其陶瓷膜孔径0.2μm。陶瓷膜分离枸杞糖肽的工艺条件为：操作压力为0.2MPa，温度为45℃，稀释倍数为4倍。分离纯化后进行真空冷冻干燥，得枸杞糖肽粉。

4、覆盆子果浆的制备：将新鲜的覆盆子榨汁，加入1份的果胶酶，50℃，酶解1.5h后，在80℃下加热0.4h灭酶，冷却后，过80目筛，得到覆盆子原浆。

5、以质量份数计，将40份枸杞糖肽、700份覆盆子果浆和35份低聚果糖复配，得到枸杞糖肽辅助降血压口服液。

6、将枸杞糖肽辅助降血压口服液，封装到的洁净玻璃容器中，并遮光保藏。将包装好的产品，放入到70℃水浴锅中0.4h进行灭菌，灭菌后迅速放入冰水混合物中，直到口服液的温度降到常温。

实施例3

一种枸杞糖肽辅助降血压口服液的制备方法，该方法包括以下步骤：

1、称量枸杞干果原料，枸杞干果原料中水分含量为12.10％，枸杞干果通过高速万能粉碎机粉碎，过100目筛，备用。

2、取粉碎并烘干后的枸杞粉，以去离子水为溶剂，枸杞粉与水的质量比为1:5，通过超声微波萃取仪在提取功率为175W，提取温度为80℃，提取时间为120min时提取枸杞糖肽，得到枸杞糖肽粗提物。

3、称取一定量枸杞糖肽粗提物，置入无机陶瓷膜设备中，经离心泵循环打入膜组件中进行过滤，透过液经膜组件流出，截留液回到物料槽中，流速与压力由阀门控制。采用无机陶瓷膜设备分离纯化枸杞糖肽粗提物，其陶瓷膜孔径0.3μm。陶瓷膜分离枸杞糖肽的工艺条件为：操作压力为0.3MPa，温度为55℃，稀释倍数为5倍。分离纯化后进行真空冷冻干燥，得枸杞糖肽粉。

4、覆盆子果浆的制备：将新鲜的覆盆子榨汁，加入2份的果胶酶，55℃，酶解2h后，在90℃下加热0.5h灭酶，冷却后，过100目筛，得到覆盆子原浆。

5、以质量份数计，将60份枸杞糖肽、1000份覆盆子果浆和50份低聚果糖混合，得到枸杞糖肽辅助降血压口服液。

6、将枸杞糖肽辅助降血压口服液封装到的洁净玻璃容器中，并遮光保藏，将包装好的产品，放入到90℃水浴锅中0.1h进行灭菌，灭菌后迅速放入冰水混合物中，直到样品温度降到常温。

实施例4

一种枸杞糖肽辅助降血压口服液的制备方法，该方法包括以下步骤：

1、称量枸杞干果原料，枸杞干果原料中水分含量为15％，枸杞干果通过高速万能粉碎机粉碎，过60目筛，备用。

2、取粉碎并烘干后的枸杞粉，以去离子水为溶剂，枸杞粉与水的质量比为1:3，通过超声微波萃取仪在提取功率为100W，提取温度为40℃，提取时间为30min时提取枸杞糖肽，得到枸杞糖肽粗提物。

3、称取一定量枸杞糖肽粗提物，置入无机陶瓷膜设备中，经离心泵循环打入膜组件中进行过滤，透过液经膜组件流出，截留液回到物料槽中，流速与压力由阀门控制。采用无机陶瓷膜设备分离纯化枸杞糖肽粗提物，其陶瓷膜孔径0.1μm。陶瓷膜分离枸杞糖肽的工艺条件为：操作压力为0.1MPa，温度为25℃，稀释倍数为3倍。分离纯化后进行真空冷冻干燥，得枸杞糖肽粉。

4、覆盆子果浆的制备：将新鲜的覆盆子榨汁，加入0.3份的果胶酶，45℃酶解1h后，在70℃条件下加热0.3h灭酶，冷却后，过60目筛，得到覆盆子原浆。

5、以质量份数计，将20份枸杞糖肽，500份覆盆子果浆，25份低聚果糖混合，得到枸杞糖肽辅助降血压口服液。

6、将枸杞糖肽辅助降血压口服液，封装到的洁净玻璃容器中，并遮光保藏，将包装好的产品，放入到85℃水浴锅中0.3h进行灭菌，灭菌后迅速放入冰水混合物中，直到口服液的温度降到常温。

实施例5

一种枸杞糖肽辅助降血压口服液的制备方法，该方法包括以下步骤：

1、称量枸杞干果原料，枸杞干果原料中水分含量为14％，枸杞干果通过高速万能粉碎机粉碎，过60目筛，备用。

2、取粉碎并烘干后的枸杞粉，以去离子水为溶剂，枸杞粉与水的质量比为1:5，通过超声微波萃取仪在提取功率为200W，提取温度为75℃，提取时间为100min时提取枸杞糖肽，得到枸杞糖肽粗提物。

3、称取一定量枸杞糖肽粗提物，置入无机陶瓷膜设备中，经离心泵循环打入膜组件中进行过滤，透过液经膜组件流出，截留液回到物料槽中，流速与压力由阀门控制。采用无机陶瓷膜设备分离纯化枸杞糖肽粗提物，其陶瓷膜孔径0.3μm。陶瓷膜分离枸杞糖肽的工艺条件为：操作压力为0.3MPa，温度为55℃，稀释倍数为5倍。分离纯化后进行真空冷冻干燥，得枸杞糖肽粉。

4、覆盆子果浆的制备：将新鲜的覆盆子榨汁，加入2份的果胶酶，55℃酶解2h后，在90℃下加热0.5h灭酶，冷却后，过80目筛，得到覆盆子原浆。

5、以质量份数计，将50份枸杞糖肽、1000份覆盆子果浆和50份低聚果糖混合，得到枸杞糖肽辅助降血压口服液。

6、将枸杞糖肽辅助降血压口服液封装到的洁净玻璃容器中，并遮光保藏，将包装好的产品，放入到90℃水浴锅中0.15h进行灭菌，灭菌后迅速放入冰水混合物中，直到样品温度降到常温。

对比例1

将实施例1中的枸杞糖肽换成枸杞粉，其他不变。

对比例2

将实施例2中的枸杞糖肽换成枸杞粉，其他不变。

对比例3

将实施例3中的枸杞糖肽换成枸杞粉，其他不变。

分别取实施例1～5制得的枸杞糖肽辅助降血压口服液进行感官评价，感官评价人员共二十名，根据感官评价标准进行评分，去除最大值后最小值后对其余评分综合取平均值(评分取一位小数，四舍五入)，具体评分标准如表1所示，感官评定标准值如表2所示，具体评价结果如表3所示(结果为二十名感官评定人员评分的平均值)。

表1感官评定标准

表2感官评定标准值

表3感官评定结果

由表3可得，本发明制备得到的枸杞糖肽辅助降血压口服液感官评价总分都在35分以上，色泽、香气、滋味、组织状态评分都在8分及以上，感官实验结果表明：本发明制备得到枸杞糖肽辅助降血压口服液感官品质好。

急性毒性实验

一、实验材料

动物：昆明种小白鼠，体重20～28g，雌雄各半，山东大学生物试验室育种。实验物：枸杞糖肽辅助降血压口服液。

二、方法

1、LD50计算：采用改良寇氏法，将实验小白鼠随机分为5组，每组10只，雌雄各半，将本发明加蒸馏水溶解，配成最大浓度，按小鼠最大允许量给药，所给剂量按生药量依次为18、14.4、11.5、9.2、7.4(g·kg

2、最大耐受剂量测定(MTD值)：取小鼠20只，雌雄各10只。将本发明加蒸馏水溶解，配成最高浓度，按动物最大耐受量，以注射灌喂器能抽动为准。在动物禁食(不禁水)18小时后，一日内分两次给药(间隔半小时)，每次0.5mL(每mL含生药0.36g)，总药量为18g生药/kg·d，相当临床成人50Kg体重用量的300倍。给药后连续观察7天。

三、试验结果

在LD50计算中当用最大允许浓度和最大允许容量给予小白鼠时(18g/Kg·d)，未见小鼠死亡，即未测出LD50，只可求最大耐受剂量，在7天观察期中，动物其食欲、活动、毛色、精神状态等皆正常，发育正常，未见有死亡。即选用相当于临床剂量的300倍药量，并无不良反应发生，表明急性毒性极小，MTD＞18g/Kg·d。

实施例2：急性毒性及长期毒性的试验结果

急性毒性实验：通过小白鼠一次性灌胃给予本发明，最高浓度35％，最大灌胃容量0.4mL/10g，剂量14g/Kg(每mL相当于10g生药)，连续观察7天，未发现任何毒性反应，因浓度和剂量无法增加，故未能测出该药的LD50。最大耐受量测定：以最高浓度、最大灌胃容量，小白鼠灌胃给药3次，间隔5小时，然后连续观察7天，无一例死亡。药粉剂量为＞42g/Kg·d(每mL相当于10g生药)，按公斤体重计算相当于成人临床日用量的420倍。

长期毒性试验：分别给予大鼠本发明饲喂，按成人临床日用量的70倍和35倍(即7g/Kg.d和3.5g/Kg.d)，连续饲喂8周，未见大鼠的行为、进食、体重出现异常情况，与对照组相比，血常规、肝肾功能、各种重要脏器均无异常变化，在所给药剂量范围内，未发现本发明的口服液有任何毒副反应。通过动物急性、慢性试验证明，本发明的口服液应用安全。

ACE抑制率的测定：

ACE抑制活性测定的具体步骤如下：离心管中依次加入125μL 6.5mmol/LHHL(马尿酰-组氨酰-亮氨酸)和50μL样品，37℃预热5min后加入50μLACE，接着继续在37℃条件下水浴反应1h。反应结束后加入125μL1mol/LHCl溶液终止反应，继续加入750μL乙酸乙酯提取，吸取500μL抽提液于2.0mL离心管中，挥发除去乙酸乙酯后加入1.5mL去离子水充分溶解，在228nm波长处测定吸光度。其中，对照组用去离子水代替样品，空白组预先加入HCl，其余条件不变。ACE抑制率计算公式如下：

式中：A

将实施例1～5和对比例1～3制备的口服液进行测试，测试结果如表4所示。

表4各实施例和对比例的ACE抑制率

由表4可得，本发明制备得到的枸杞糖肽辅助降血压口服液对比枸杞粉调配得到口服液具有较为明显的降血压功能，ACE抑制结果表明：本发明制备得到枸杞糖肽辅助降血压口服液具有较好的降血压功能。

药理学试验

一、试验材料

动物：自发性高血压大鼠(SHRs，SPF级无特定病原体)，雄性，体重260-300g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，生产许可证号：SCXK(京)2016-0006，合格证编号：11400700244657，11400700244660。实验物：本发明口服液。

二、试验方法

取20只10周雄性SHR大鼠进行测试。饲养条件：将大鼠置于SPF动物实验室，分笼饲养，自由进食、饮水。室温控制在约25℃，湿度65℃，12h关照/黑暗，保持安静，排除其他干扰。实验动物随机分为4组(n＝5)，分别灌胃本发明(1mg/Kg·d，溶于生理盐水中)、缬沙坦(30mg/Kg·d，溶于生理盐水中)、氨氯地平((1mg/Kg·d，溶于生理盐水中)、等量生理盐水灌胃4周。采用夹尾法测量灌胃前后的血管收缩压。大鼠在清醒状态下，置于38℃恒温箱10min后，固定于测量箱中，鼠尾穿过尾套；待其安静后，给尾套充气加压，使脉搏波逐渐减小至消失，然后放气至脉搏波完全正常。收缩压为脉搏阻断后再次出现波形时所对应的血压值，每只重复测量三次，取平均值，结果如表5所示。

表5药物治疗前后大鼠收缩压(SBP)变化

注：14周为10周大鼠在经过4周灌胃处理。

由表5可得，本发明制备得到的枸杞糖肽辅助降血压口服液对比生理盐水灌胃4周后的血压，具有较为明显的降血压功能，且与缬沙坦、氨氯地平这两组降压药相比，降血压功能略有降低，小鼠试验结果表明：本发明制备得到枸杞糖肽辅助降血压口服液具有较好的降血压功能。