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一种用于基因组片段扩增的微量动物样品基因组DNA模板的快速制备方法

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本发明属于生物技术领域，涉及一种用于基因组片段扩增的微量动物样品基因组DNA模板的快速制备方法，其特征在于将微量动物组织或细胞置于YSY缓冲液中，再将混合液经过孵育、变性、和冷却，即可获得可用于常规PCR扩增或定量PCR扩增的DNA模板。本发明公布的微量动物样品体积小于1mm3，具核细胞数不少于1个；YSY缓冲液由盐溶液、去垢剂、和蛋白裂解酶组成。缓冲液与微量动物组织或细胞的混合比例是10体积缓冲液：小于1体积的微量样品。缓冲液与动物样品混合后经孵育、变性、和冷却，即可获得可用于常规PCR扩增或定量PCR扩增的DNA模板。该方法特别适用于大规模基因型鉴定所需微量基因组DNA模板的制备。

著录项

公开/公告号CN112094840A

专利类型发明专利
公开/公告日2020-12-18

原文格式PDF
申请/专利权人南京尧顺禹生物科技有限公司;
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申请/专利号CN201910524002.3
发明设计人不公告发明人;
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申请日2019-06-17
分类号C12N15/10(20060101);C12Q1/6806(20180101);
代理机构
代理人
地址 211812 江苏省南京市浦口区永宁街道琥珀路1号浦口经济开发区低碳谷24号研发办公楼
入库时间 2023-06-19 09:13:40

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2022-04-22

实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/10 专利申请号:2019105240023 申请日:20190617

实质审查的生效

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1. 一种用于基因组片段扩增的微量动物样品基因组DNA模板的快速制备方法 [P] . 中国专利： CN112094840A . 2020-12-18
2. 一种微量动物细胞基因组DNA模板制备液及相应的DNA模板制备方法 [P] . 中国专利： CN101948828A . 2011-01-19
3. Control primer annealing to improve the specificity of annealing in nucleic acid amplification kit.Methods for amplifying a nucleic acid sequence of a DNA or a mixture of nucleic acids.And for selectively amplifying a nucleic acid sequence of a target DNA or a mixture of nucleic acids, and a sequence of the target nucleic acid from a mRNA.Method for detecting the complementarity of DNA to mRNA differentially expressed in two or more samples of nucleic acid, methods for amplifying a fragment of the cDNA and DNA quickly target.And to amplify a population of cDNAs of filament double full-length complementary to mRNAs cDNAs, and filament double fortified with 5 'complementary to mRNAs,Method to amplify rather than a sequence of nucleotu00ecdeo target at the same time, methods for producing a digital printing gDNA DNA, and RNA in a sample of mRNA.Method for identifying segments of homology is conserved in a family of multigene from a sample of mRNA, a method for the mutagenesis in a target [P] . BR0214741A . 2004-11-23

机译：控制引物退火，以提高核酸扩增试剂盒中退火的特异性。扩增DNA或核酸混合物的核酸序列的方法以及选择性扩增靶DNA或核酸混合物的核酸序列的方法用于检测DNA与两个或多个核酸样品中差异表达的mRNA的互补性的方法，扩增cDNA和DNA片段的方法可快速靶向。全长与mRNA cDNA互补的双细丝cDNA的cDNA群体，以及与mRNA互补的5'增强双细丝的cDNA，同时扩增而不是核苷酸靶序列的方法，产生数字印刷gDNA DNA的方法mRNA样品中的RNA和RNA.mRNA样品的多基因家族中用于鉴定同源片段的方法是保守的，这是一种在靶标中诱变的方法
4. The recombinant plasmid DNA pVar 15-HIV-LTR, cloned genomic fragments SUPPORTING HIV-1 type from conserved regions of 5'-LTR Sequences, recombinant plasmid DNA pBluKSM-HIV-LTR mod, CARRIER cloned modified fragment of the same part of the HIV genome type 1 test KIT FOR RAPID IDENTIFICATION OF QUANTITATIVE genome of HIV-1 in the sample ANY KIND AND METHOD with its use [P] . 俄罗斯专利： RU2006112788A . 2007-10-27

机译：重组质粒DNA pVar 15-HIV-LTR，克隆的支持5'-LTR序列保守区的HIV-1类型的基因组片段，重组质粒DNA pBluKSM-HIV-LTR mod，CARRIER克隆了HIV同一部分的修饰片段基因组类型1测试试剂盒，用于快速鉴定样品中HIV-1的定量基因组任何种类和方法，及其使用
5. Control primer annealing to improve the specificity of annealing in nucleic acid amplification, kit, methods for amplifying nucleic acid sequences of DNA and sequence of target nucleic acid or a mixture of nucleic acids, to detect the complementari Dade of DNA to mRNA differentially expressed in two or more samples of nucleic acid.To amplify a fragment of the cDNA target quickly, to amplify a population of cDNAs of filament double full-length complementary to mRNAs cDNAs, and filament double fortified with 5 'complementary to mRNAs to amplify rather than a sequence of nucleotide al VO at the same time, to produce a digital printing gDNA DNA, and RNA in a sample of mRNA.To identify segments of homology is conserved in a multigene family from a sample of mRNA, to identify a variation of nucleotide in a target nucleic acid, for mutagenesis in a target nucleic acid, and use of the initiator [P] . BRPI0214741B1 . 2015-05-12

机译：控制引物退火以改善核酸扩增中退火的特异性，试剂盒，扩增DNA核酸序列和靶核酸序列或核酸混合物的方法，检测DNA与mRNA互补表达的互补性（两种）或更多核酸样品。要快速扩增cDNA靶标的片段，以扩增与mRNA cDNA互补的长丝两倍全长的cDNA群体，并用与mRNA互补的5'双重修饰的长丝进行扩增而不是序列同时鉴定一个核苷酸的VO片段，以产生一个数字印刷的gDNA DNA和一个mRNA样品中的RNA。从一个mRNA样品中鉴定一个多基因家族中的同源片段是保守的，以鉴定一个核苷酸中一个核苷酸的变异。靶核酸，用于在靶核酸中诱变，以及引发剂的用途