一种基于PCR技术的拟穴青蟹遗传性别快速鉴定方法

摘要

本发明涉及一种基于PCR技术的拟穴青蟹遗传性别快速鉴定方法，主要包括：(1)设计对照引物和利用碱基错配的方法来设计雌性特异性引物；(2)提取待测拟穴青蟹个体基因组DNA；(3)分别利用对照引物和雌性特异性引物，以拟穴青蟹基因组DNA作为模板，在退火温度为65℃下进行PCR扩增，获得相应的PCR产物；(4)采用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，判断雌雄个体。本发明利用性别特异性SNP位点的碱基错配方法进行雌性特异性引物的设计，通过优化的PCR反应体系以及PCR反应程序扩增后进行琼脂糖凝胶电泳检测可实现对拟穴青蟹的遗传性别鉴定，具有操作简便、准确率高、成本低、重复性好和实用性强的优点，可用于大规模快速鉴定生长发育早期拟穴青蟹的遗传性别。