核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白在治疗EV71感染药物中的应用

摘要

本发明公开了一种核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白在治疗EV71感染药物中的应用，步骤是：A、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3抗病毒活性的评价；B、以从THP‑1细胞中提取的总mRNA为模板，通过反转录PCR扩增得到总的cDNA，再以总的cDNA为模板，用引物扩增得到NLRP3基因片段；C、挑取菌株BL21‑pGEX‑6p‑1‑NLRP3单菌落，接入含有氨苄霉素的LB液体培养基中，摇床上摇菌过夜；转接菌液至含20mL培养基的50mL摇瓶中，摇床上摇菌表达NLRP3蛋白，用亲和层析提取纯化NLRP3蛋白，蛋白液用超滤管离心浓缩，得到NLRP3冻存液；D、将NLRP3蛋白加入到细胞中再加EV71，检测EV71VP1的mRNA水平和蛋白水平。方法易行，操作简便，NLRP3的抗病毒作用机制是通过改变细胞内的信号通路来抑制病毒复制，抗病毒的机制多样化。