一种识别高果糖浆掺假蜂蜜的方法

摘要

本发明提供一种识别高果糖浆掺假蜂蜜的方法，以α‑二羰基化合物作为靶标物质，检测出含有所述靶标物质的蜂蜜样品即为高果糖浆掺假蜂蜜；具有指示作用的α‑二羰基化合物包括：1,2‑二酮‑戊糖、2,3二酮‑戊糖、3‑脱氧‑1,2‑二酮‑戊糖、1‑脱氧‑2,3‑二酮‑戊糖中的一种或多种。本发明提出的方法，通过检测筛选的4种α‑二羰基化合物作为鉴别多类型高果糖浆掺假鉴别的靶标化合物。该方法简单有效，一次分析，可以覆盖目前主要高果糖浆掺假蜂蜜。

说明书

技术领域

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种对掺高果糖浆的蜂蜜的检测方法。

背景技术

蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物结合后，经充分酿造而成的天然甜物质。由于蜂蜜具有重要的营养价值和保健作用，长期以来深受人们的喜爱。蜂蜜是极易掺假的食品。由于利益驱动，近年来有些个体户及厂家，向蜂蜜中掺入糖、转化糖、果糖、葡萄糖、葡糖高果糖浆、果葡糖等，制造掺假蜂蜜，有些生产厂家甚至以葡萄糖、果葡高果糖浆、蜂蜜香精等替代原料制造蜂蜜,以天然蜂蜜的形式投放市场，坑骗消费者以获取暴利，损坏了我国天然蜂蜜的产品信誉。特别是近些年出现一种新型的掺假，以大米高果糖浆、甜菜高果糖浆掺假，因为其与蜂蜜的C同位素接近，结合比较先进的制造工艺去除了一些多糖，目前常规检测方法，如蜂蜜中高果糖淀粉高果糖浆测定方法-薄层色谱法与离子色谱法，以及碳-4植物糖含量测定方法-稳定碳同位比例法等鉴别蜂蜜真伪的方法无法辨别其真假。同时因为多种方法存在，企业检测原料，往往要进行多种方法同时检测，极大增加了企业成本，不利于行业健康发展。因此，急需建立一种能够同时测定多种高果糖浆掺假蜂蜜的鉴别方法。近几年，陆续有文章和一些实验室方法进行了同时多种高果糖浆鉴别方法的尝试，但是因为没有明确的靶标，或是标准物质作为支持，导致方法科学性差，误判率高。

发明内容

针对现有技术的不足之处，本发明要解决的技术问题是提供一种可以同时识别多种类型高果糖浆掺假蜂蜜的方法。

实现本发明上述目的的技术方案为：

一种识别高果糖浆掺假蜂蜜的方法，以α-二羰基化合物作为靶标物质，检测出含有所述靶标物质的蜂蜜样品即为高果糖浆掺假蜂蜜；

具有指示作用的α-二羰基化合物包括：1,2-二酮-戊糖、2,3二酮-戊糖、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖、1-脱氧-2,3-二酮-戊糖中的一种或多种。

进一步地，进行检测的方法为液相色谱荧光检测法、高效液相色谱飞行时间质谱法和液相色谱串联质谱法中的一种或二种。

优选地，使用邻苯二胺、5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶、2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶中的一种作为衍生剂。

其中，衍生条件为，取蜂蜜样品1～20g，在pH值3.0～9.0条件下，加入过量衍生剂，反应温度从10℃到130℃之间，反应30min～24h。

其中，用于定量所述α-二羰基化合物的标准品的制备方法为：取摩尔比例1：1：2：(0.5～2)的核糖、葡萄糖、衍生剂，在pH为3.0～9.0的缓冲溶液中，优选pH范围为4.0～5.0；在100～150℃下反应50～80min，反应后置于冰水中冷却。

本方法中，结合方法的检出限，设定阳性的阈值如下：当样品中任意检出这4种α-二羰基化合物任意一种或多种，且只要4种化合物中任意一种的含量超过如下规定：1,2-二酮-戊糖、2,3-二酮-戊糖含量≥50μg/kg、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖、1-脱氧-2,3-二酮-戊糖含量≥20μg/kg时，即可判定该样品为高果糖浆掺假(大于20％的添加)。

本发明一种优选技术方案为，所述的方法包括步骤：

1)衍生：蜂蜜样品在pH＝3.0～9.0的缓冲溶液中，优选pH范围为4～5；加入质量浓度为0.1～5％衍生剂溶液，在常温、避光条件下，反应10～20h，蜂蜜样品和衍生剂溶液的比例为1～3g：1mL；

2)纯化：反应溶液经反相柱净化，用水清洗，再用流动相洗脱后，用水定容，用滤膜过滤，

3)色谱检测：使用液相色谱荧光或质谱法检测。

其中，步骤2)所述反相色谱柱为C18，C8，苯基填充柱中的一种；流动相为乙腈水溶液或甲醇水溶液，流速为0.2～1.0mL/min。

其中，步骤3)所述液相色谱荧光检测中，荧光检测器的激发波长为270～370nm，发射波长为420～520nm。

其中，步骤3)所述质谱法为电喷雾质谱法，雾化气温度为250～350℃，雾化气流速为6～12L/min，雾化气压力为30～50psi，鞘气温度为260～350℃，鞘气流速为6-12L/min，电离电压为4000kv，碎片电压为60～175,扫描方式为正离子模式，全扫描以及多反应监测模式。监测离子为上述的三种不同衍生剂的衍生化反应产物。全扫描方式时，监测该类化合物的准分子离子以及其特征的碎片，失去一分子或二分子H₂O，失去CH₂O、CH₂CO和CHOH＝CHOH。使用多反应监测模式时，使用准分子离子M+H，以及M+H-18,M+H-36,M+H-30作为监测离子对进行定量检测。

本发明的技术方案具有如下优点：

本发明通过对高果糖浆加入蜂蜜的加工工艺的研究，确定不同的原料和加工方式导致α-二羰基化合物种类和含量不同，因此以α-二羰基化合物作为靶标物质，确定了可以同时识别多类型高果糖浆掺假蜂蜜的方法。

本发明提出的方法，通过检测筛选的4种α-二羰基化合物作为鉴别多类型高果糖浆掺假鉴别的靶标化合物。该方法简单有效，一次分析，可以覆盖目前主要高果糖浆掺假蜂蜜。

针对α-二羰基化合物分子量小，易溶于水，无法直接制备该类化合物纯品的问题，本发明采用在戊糖和半光氨酸的美拉德反应体系中溶液生成α-二羰基化合物，该化合物易与邻苯二胺，5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶和2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶反应可以生成稳定的喹喔啉和喋啶衍生物。本发明方法制备的标准品可以准确定量高果糖浆和蜂蜜样品中的4种α-二羰基化合物，为科学鉴别高果糖浆掺假蜂蜜提供了有效的科学依据。

附图说明

图1高果糖浆和蜂蜜中1,2-二酮-戊糖、2,3-二酮-戊糖的质谱TIC图。

图2高果糖浆和蜂蜜中3-脱氧-1,2-二酮-戊糖和1-脱氧-2,3-二酮-戊糖的质谱TIC图。

图3荧光色谱检测高果糖浆和蜂蜜中的4种特征物色谱图。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例中，若无特别说明，所使用的方法均为本领域常规的方法。

实施例1

1、实验样品常见的高果糖浆样品其中大米高果糖浆样品11个，编号DM1-DM11；玉米高果糖浆样品23个，编号YM1-YM23；甜菜高果糖浆样品9个，编号TC1-TC9；蔗糖高果糖浆14个，编号ZT1-ZT14；木薯高果糖浆6个。

2、实验用真实蜂蜜样品：油菜蜂蜜32个，编号YC1-YC32；洋槐蜂蜜33个，编号YH1-YH33；枣花蜂蜜15个，编号ZH1-ZH 15；椴树蜂蜜12个，编号DS1-DS 12；荆条蜂蜜30个，编号JT1-JT 30；荔枝蜂蜜5个，编号LZ1-LZ 5；龙眼蜂蜜3个，编号LY1-LY 3；荞麦蜂蜜4个，编号QM1-QM4；向日葵蜂蜜5个，编号XRK1-XRK5；麦卢卡蜂蜜7个，编号MNK1-MNK 7；三叶草蜂蜜4个，编号SYC1-SYC 3；多花种混合蜂蜜32个，编号DHZ1-DHZ 32；中蜂蜜13个，编号ZF1-ZF13。

3、样品提取与衍生(实施例1、3、4三种衍生剂试验中，衍生剂浓度为质量浓度)：称取高果糖浆或蜂蜜样品2g，用pH＝5.0的磷酸盐缓冲溶液2mL溶解，加入1mL的1％邻苯二胺水溶液，常温避光反应24h；

4、样品净化：①衍生完的样品，经微孔滤膜过滤后直接测定(这是开始发现差异的实验)；②衍生后的样液分批经过OASIS HLB(6ml，200mg，使用前，用5ml甲醇和10ml水活化)柱净化，样液流完后，用3mL水清洗，使用3ml乙腈洗脱，加水定容至10mL，滤膜过滤后，测定。

典型的邻苯二胺的衍生物信息如下：

1,2-二酮-戊糖的邻苯二胺衍生物：

2,3二酮-戊糖的邻苯二胺衍生物：

3-脱氧-1,2-二酮-戊糖的邻苯二胺衍生物：

1-脱氧-2,3-二酮-戊糖的邻苯二胺衍生物：

5、超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)分析α-二羰基化合物三种类型的衍生物，比较高果糖浆与天然蜂蜜的在α-二羰基化合物差异，用于筛选特征性的α-二羰基化合物指示物。液相色谱串联质谱分析具体条件为：

液相色谱：gilent 6545UHPLC-Q-TOF/MS，色谱柱Agilent AQ C18，2.1×100，3.5μm；柱温：30℃；流动相：甲醇A+0.2％甲酸水溶液B，梯度洗脱，0-3min，A+B＝10+90；3-15min，A+B＝60+40；15-20min，A+B＝10+90；20-21min,A+B＝90+10；21-30min,A+B＝90+10；流速：0.2mL/min；紫外检测波长：280nm，320nm；进针体积：10μL；

质谱分析：ESI+,雾化气温度：320℃，雾化气流速：6L/min；雾化气压力：40psi；鞘气温度：320℃；鞘气流速：16L/min；电离电压：4000kv；碎裂电压115；扫描方式：全扫描；扫描范围60-500；二级碎片，Target MS/MS模式，线性碰撞0-25eV，明确三种衍生物质谱碎片。高果糖浆和天然蜂蜜中α-二羰基化合物衍生物(邻苯二胺)的质谱TIC图见图1和图2。图1为高果糖浆和蜂蜜中1,2-二酮-戊糖、2,3-二酮-戊糖的差异比较(提取221.0921(保留时间1.908，2.089)，蜂蜜图中该位置未提取到相关化合物，可以看出在高果糖浆里含量明显高于普通蜂蜜)。图2为高果糖浆和蜂蜜中3-脱氧-1,2-二酮-戊糖和1-脱氧-2,3-二酮-戊糖的差异比较(提取205.0971(保留时间2.112，4456)，蜂蜜图中该位置提取到痕量的相关化合物，可以看出在高果糖浆里含量明显高于普通蜂蜜)。

从图1可以看出，高果糖浆和蜂蜜在α-二羰基化合物上存在明显差异，天然蜂蜜和高果糖浆共有的α-二羰基化合物1,2-二酮-戊糖、2,3-二酮-戊糖，但是含量有明显差异(色谱峰高度比较)，3-脱氧-1,2-二酮-戊糖、1-脱氧-2,3-二酮-戊糖、1,4-二脱氧-2,3-二酮-戊糖等α-二羰基化合物在高果糖浆中的含量明显高于天然蜂蜜，可以作为鉴别多类高果糖浆掺假蜂蜜的指示物。邻苯二胺、5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶、1,2-二酮-戊糖、2,3二酮-戊糖、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖、1-脱氧-2,3-二酮-戊糖典型的质谱信息(质量数误差±5ppm)为:邻苯二胺衍生物，

其中1,2-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝221.0920,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝203.0181,[M+H-2H₂0]＝185.0707,[M+H-H₂0-CH₂O]＝173.0075，[M+H-2H₂0-CO]＝157.0757；

2,3二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝221.0921,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝203.0182,[M+H-2H₂0]＝185.0709,[M+H-H₂0-CH₂CO]＝173.0074；[M+H-H₂0-CH₂CO]＝161.0075；

3-脱氧-1,2-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝205.0971,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝187.0864,[M+H-2H₂0]＝169.0758,[M+H-H₂0-CH₂O]＝157.0757；

1-脱氧-2,3-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝205.0970,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝187.0865,[M+H-2H₂0]＝169.0757,[M+H-CH₂O]＝175.0865。

6、主要特征物衍生物的制备：为了准确定量高果糖浆和蜂蜜中这4种α-二羰基化合物的含量及分布，需要制备该4种化合物的标准品。因为α-二羰基化合物分子量小，易溶于水，直接制备该类化合物获取纯品是不可能的。在戊糖和半光氨酸的美拉德反应体系中溶液生成α-二羰基化合物，同时该类化合物易与邻苯二胺，5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶和2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶反应可以生成稳定的喹喔啉和喋啶衍生物。由于邻苯二胺价格便宜，易于购买，本实施例选取了邻苯二胺作为衍生化试剂，并根据此反应制备到多种类型的α-二羰基化合物的喹喔啉衍生物，并用做标准物质，准确定量高果糖浆和蜂蜜中α-二羰基化合物。反应液：取0.1M核糖和0.1M葡萄糖、0.2M L-半胱氨酸以及0.1M邻苯二胺，加入15mL磷酸盐缓冲液溶液(0.2M，pH为4.5)，置于烘箱中，在115℃下反应60min，反应后置于冰水中冷却，样品过滤膜后，用于液相色谱分析。

标准物质的液相色谱条件：色谱柱Zorbax SB-C18，21.2×250mm，流动相为水+甲醇，梯度洗脱程序：0～8min，30％B；8～20min，30％-60％B；20～30min，60％-80％B；30～35min，30％B；流速18ml/min，进样量2ml，检测波长320nm，根据出峰时间接取每个峰所对应的α-二羰基化合物喹喔啉衍生物的洗脱液，其中，8-10min为1,2-二酮-戊糖；10.5-12.5min为2,3-二酮-戊糖、15-17min为3-脱氧-1,2-二酮-戊糖、17.7-19.5min为1-脱氧-2,3-二酮-戊糖，将收集液冷冻干燥得到冻干品，通过高分辨质谱定性以及液相色谱在320nm和254nm测定物质纯度，根据文献比较质谱及碎片可以确认获得干品为需要的α-二羰基化合物喹喔啉衍生物，液相色谱测定其纯度均大于96％，可以用于高果糖浆和蜂蜜中α-二羰基化合物的定量分析。

7、液相色谱荧光检测分析高果糖浆和蜂蜜中的α-二羰基化合物。1)样品处理按照步骤3处理：称取高果糖浆或蜂蜜样品2g，用pH＝5.0磷酸盐缓冲溶液2mL溶解，加入1％邻苯二胺，常温避光反应24h，衍生完的样品，经微孔滤膜过滤后直接测定；2)衍生后的样液分批经过OASIS HLB(6mL，200mg，使用前，用5mL甲醇和10mL水活化)柱净化，样液流完后，用3ml水清洗，使用3mL乙腈洗脱，加水定容至10mL，滤膜过滤后，液相色谱荧光检测器测定。仪器条件：超高效液相色谱配有荧光检测器(WATERS UPLC-FLD)；色谱柱：ACQUITY BEH C18,1.7μm,2.1×100mm；柱温：30℃；流速：0.4mL/min；流动相：A水，流动相：B甲醇，梯度洗脱，0-1min,10％B；1-4min，40％B；4-6min,80％B；6.1-7min，10％B，后运用2min；荧光检测器设置：激发波长320nm,发射波长470nm。

典型的高果糖浆和蜂蜜样品色谱图见图3。图3为荧光色谱检测高果糖浆和蜂蜜中的4种特征物色谱图(从图中可以看出糖浆中四种化合物含量明显高于蜂蜜中四种化合物)。

4种化合物的检出限LOD分别为1,2-二酮-戊糖4.5μg/kg；2,3-二酮-戊糖4.6μg/kg；3-脱氧-1,2-二酮-戊糖3.3μg/kg；1-脱氧-2,3-二酮-戊糖3.2μg/kg。

所有的高果糖浆样品中均有这4种α-二羰基化合物，特别是2,3-二酮-戊糖、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖和1,4-二脱氧-2,3-二酮-戊糖在普通的蜂蜜中痕量，而在糖浆中保持较高的含量。考虑基质影响，结合方法的检出限，设定阳性的阈值如下：当样品中任意检出这4种α-二羰基化合物任意一种或多种，且只要4种化合物中任意一种的含量超过如下规定：1,2-二酮-戊糖、2,3-二酮-戊糖含量≧50μg/kg、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖、1-脱氧-2,3-二酮-戊糖含量≧20μg/kg时，即可判定该样品为高果糖浆掺假(大于20％的添加)。

通过将不同的高果糖浆加入天然蜂蜜，分别添加10％，20％，30％，50％，按照上述处理和检测方法分析添加样品，通过分析4种α-二羰基化合物，可以准确识别添加20％的各类高果糖浆。

液相色谱荧光检测分析显示，通过检测筛选的4种化合物可以作为鉴别多类型高果糖浆掺假鉴别的靶标化合物。该方法简单有效，一次分析，可以覆盖目前主要高果糖浆掺假蜂蜜。制备所得的标准品可以准确定量高果糖浆和蜂蜜样品中的4种α-二羰基化合物，为科学鉴别高果糖浆掺假蜂蜜提供了有效的科学依据。

实施例2

样品来源：山东省蜂业总站，送检20个疑似高果糖浆掺假样品，其中15个通过GB/T18932.1-2002蜂蜜中碳-4植物糖含量测定方法稳定碳同位素比率法测定，确证为玉米高果糖浆掺假。其他疑似2个样品认为甜菜高果糖浆掺假样品，2个为大米高果糖浆掺假样品，1个为麦芽高果糖浆掺假样品。

样品处理：称取样品2g，加入pH＝6.0磷酸盐缓冲溶液2mL溶解，加入1mL 1％的邻苯二胺溶液，混合1min，过夜避光反应12h后，0.22μm过滤，采用超高效液相色谱串联质谱测定。

液相色谱串联质谱测定条件：Agilent 6495串联质谱仪，色谱柱Agilent ZorbaxSB-Aq，2.1×100mm，3.5um；柱温：30℃；流动相：A 0.1％甲酸水溶液+B甲醇，梯度洗脱，0-2min,10％B；2-10min，60％B；10-15min，80％B；15-16min，10％B；16-25min,10％B；流速：0.2ml/min；进针体积：10μL；

质谱分析：电离方式：电喷雾正离子模式(ESI+),配有离子漏斗装置；雾化气温度：320℃，雾化气流速：6L/min；雾化气压力：45psi；鞘气温度：320℃；鞘气流速：12L/min；电离电压：4kv；扫描方式：多反应检测(MRM)，具体检测离子见下表1

表1 4种α-二羰基化合物喹喔啉衍生物监测离子对及数据采集条件

a为定量离子。

结果分析：

所检测的20个样品，15个玉米高果糖浆样品检出2,3-二酮-戊糖(含量范围76-190μg/kg)、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖(含量范围35-290μg/kg)、明显大于设定的阈值，判定为高果糖浆掺假，该结果与国标同位素方法一致；

2个疑似甜菜掺假样品，检出2,3-二酮-戊糖(含量分别为97μg/kg和136μg/kg)、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖(77μg/kg和139μg/kg)判为阳性样品；

2个疑似大米高果糖浆掺假样品，检出2,3-二酮-戊糖(含量分别为67μg/kg和103μg/kg)、3-脱氧-1,2-二酮-戊糖(含量分别为79μg/kg和67μg/kg)判为阳性样品；

1个麦芽高果糖浆样品，检出3-脱氧-1,2-二酮-戊糖(含量为309μg/kg)，该样品采用液相色谱分析其中的麦芽糖，该样品麦芽糖含量大于50％，明显为掺假样品(天然蜂蜜样品麦芽糖含量≦5％)，与本方法鉴别的结果一致。

本方法与常见的蜂蜜掺假检测方法比较见下表2。

表2实施例2所述蜂蜜样品的检测结果

从表2可以看出，本方法与现有的方法相比，可以实现一次分析，判定多类型的高果糖浆掺假蜂蜜。

实施例3

蜂蜜样品同实施例1。步骤3为：称取高果糖浆或蜂蜜样品2g，用pH＝5.0磷酸盐缓冲溶液2mL溶解，加入1％5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶水溶液1mL，100℃避光反应1h后，冰块冷却。

其他操作同实施例1。

用不同的衍生剂衍射时得到的衍生物结构如下：

1,2-二酮-戊糖的5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶衍生物为：

2,3二酮-戊糖的5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶衍生物为：

3-脱氧-1,2-二酮-戊糖的5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶衍生物为：

1-脱氧-2,3-二酮-戊糖的5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶衍生物为：

衍生剂5,6-二氨基-2,4-二羟基嘧啶，典型的质谱信息(质量数误差±5ppm)为：

其中1,2-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝254.0882,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝236.0779,[M+H-2H₂0]＝218.0761,[M+H-H₂0-CH₂O]＝206.0036，[M+H-2H₂0-CO]＝190.7531；

2,3二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝254.0884,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝236.0776,[M+H-2H₂0]＝218.0763,[M+H-H₂0-CH₂O]＝206.0034，[M+H-H₂0-CH₂CO]＝194.0037；

3-脱氧-1,2-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝238.0932,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝220.0827,[M+H-2H₂0]＝202.0720,[M+H-H₂0-CH₂O]＝190.0719；

1-脱氧-2,3-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝238.0930,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝220.0824,[M+H-2H₂0]＝202.0718,[M+H-CH₂O]＝207.7555；

1,4-二脱氧-2,3-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝222.0971,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝204.0878,[M+H-CH₂CHOH]＝178.0711；

3-脱氧葡萄糖醛酮准分子离子[M+H]＝268.1043；[M+H-H20]＝250.0934，[M+H-2H20]＝232.0828，[M+H-H20-CH2O]＝220.0824，[M+H-2H20-CO]＝204.0883

丁二酮准分子离子[M+H]＝192.0879。

实施例4

称取高果糖浆或蜂蜜样品2g，用pH＝9.0磷酸盐缓冲溶液2ml溶解，加入1mL的1％2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶水溶液，60℃避光反应1h后，冰块冷却。

其他操作同实施例1。相应的典型2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶衍生物信息如下：

1,2-二酮-戊糖的2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶衍生物

2,3二酮-戊糖的2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶衍生物：

3-脱氧-1,2-二酮-戊糖的2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶衍生物

1-脱氧-2,3-二酮-戊糖的2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶衍生物：

典型的质谱信息(质量数误差±5ppm)为:2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶

其中1,2-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝255.0723,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝237.0618,[M+H-2H₂0]＝219.0601,[M+H-H₂0-CH₂O]＝206.9876，[M+H-2H₂0-CO]＝191.7371；

2,3二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝255.0724,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝237.0616,[M+H-2H₂0]＝219.0603,[M+H-H₂0-CH₂O]＝206.9877，[M+H-H₂0-CH₂CO]＝194.9876；

3-脱氧-1,2-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝239.0773,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝221.0667,[M+H-2H₂0]＝203.0560,[M+H-H₂0-CH₂O]＝191.0559；

1-脱氧-2,3-二酮-戊糖准分子离子[M+H]＝239.0770,主要的碎片离子为[M+H-H₂0]＝221.0665,[M+H-2H₂0]＝203.0558,[M+H-CH₂O]＝208.7394；

3-脱氧葡萄糖醛酮准分子离子[M+H]＝255.0723；[M+H-H₂0]＝237.0614，[M+H-2H₂0]＝219.0511，[M+H-H₂0-CH₂O]＝207.0514，[M+H-2H₂0-CO]＝191.0563

丁二酮准分子离子[M+H]＝193.0722。

虽然，以上通过实施例对本发明进行了说明，但本领域技术人员应了解，在不偏离本发明精神和实质的前提下，对本发明所做的改进和变型，均应属于本发明的保护范围内。