脐带血与外周血来源树突细胞体外刺激特异抗白血病T细胞免疫应答

摘要

目的:比较脐血(CB)及外周血(PB)单个核细胞(MNC)体外诱导生成树突状细胞(DC)的产量;并将此DC负载白血病抗原,检测两者诱导的特异性细胞毒T细胞(CTL)对白血病细胞的杀伤活性.方法:取CB及健康成人PB各8份,以淋巴细胞分离液分离获得MNCs,培养体系中加入重组人粒单核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF),重组人白细胞介素4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),并在培养第5天,加入HL-60细胞经反复冻融提取的抗原,致敏DC.培养过程中,观察树突状细胞形态,流式细胞仪(FCM)检测表型.培养第12天收获成熟DC,CB组分别与8例PB来源T淋巴细胞共培养;PB组与自体T淋巴细胞共培养,诱导产生白血病特异性CTL,乳酸脱氢酶法(LDH法)测定溶靶细胞活性.结果:(1)CB与PB来源DC均表现出成熟DC典型形态和免疫表型特征,2组DC相关分化抗原CD1a、CD83、CD86、CD80和人类白细胞相关抗原DR(HLA-DR)的表达较培养前增高,2组比较差异无统计学意义(P>0.05).(2)CB组DC产量高于PB组,差异有统计学意义(P<0.01).(3)以白血病抗原冲击的DC所刺激的T淋巴细胞对白血病靶细胞显示出明显的杀伤活性,按照各效靶比进行两者的比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:利用细胞因子体外诱导CB及PB来源MNCs均能产生大量成熟DC,且功能相同;前者DC产量更高,来源丰富,可能成为急性白血病免疫治疗中DC的丰富来源.