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人外周血不同来源的两类树突状细胞亚群体外刺激对肝癌特异性T细胞影响的实验研究

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文献回顾

实验一 人体周血两类DC亚群分离、培养、扩增、鉴定

实验二 两类DC亚群负载MAGE-1九肽后刺激同源的T淋巴细胞变化及对肝癌细胞的特异性杀伤作用

小 结

参考文献

硕士期间发表的第一作者文章

致 谢

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摘要

本实验研究MAGE抗原肽致敏人外周血两类DC亚群体外激活同源的T淋巴细胞,并在体外诱导不同而特异的抗肝癌细胞免疫。联合应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)及肿瘤坏死因子(TNFα)从健康人外周血中培养两类DC亚群,经MAGE-1九肽负载后与自身T淋巴细胞共培养,通过免疫组织化学法、玫瑰花环试验及酶联斑点计数法(Elispot)比较MAGE-1九肽特异性CTL功能和数量的变化,并进一步通过流式法和MTT试验比较CTL对肝癌细胞系SMMC-7721杀伤百分率。健康人外周血单个核细胞体外经GM-CSF和IL-4诱导可获得两类DC亚群,负载MAGE-1抗原九肽两类DC亚群刺激同源T细胞可显著上调T表面分子CD8的表达和T细胞的数量显著增多(P<0.01)。Elispot法检测分泌IFN-γ的CTL的频数:经MAGE-1抗原九肽负载B组DC亚群刺激组大于经MAGE-1抗原九肽负载A组DC亚群刺激组,且B组DC刺激的CTL对肝癌细胞系SMMC-7721杀伤百分率大于A组DC亚群,数据进行配伍组方差分析,差异均有统计学意义(P<0.01)综上所述,健康人外周血两类DC亚群体外诱导的抗肿瘤细胞免疫反应不同,提示MAGE相关肽激活的人外周血B组DC亚群有可能在肿瘤治疗中发挥着更大的作用。

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