多重PCR快速检测食品中的单核细胞增生性李斯特菌

摘要

[目的]通过对检测食源性致病菌单核细胞增生性李斯特氏菌(LM)的多重PCR体系的优化,建立一种能够在食品样品中应用的四重PCR.[方法]采用热裂解提取菌液和菌落DNA,以16S rRNA、inlAB、iap、h1y基因为靶基因设计引物,从影响多重PCR扩增的引物浓度、退火温度进行优化.[结果]通过其它5种同属异种菌即英诺克李斯特氏菌、西尔李斯特氏菌、威尔西李斯特氏菌、绵羊李斯特氏菌、格氏李斯特氏菌及副溶血性弧菌均未扩增出特异性的片段.纯培养物的最低检测限为102CFU/mL,模拟污染的生猪肉检测限不大于0.4 CFU/g.[结论]通过菌落获得DNA的多重PCR方法更好,该方法具有敏感、特异、快速及准确的优点,可用于食品中LM的快速检测.