木聚糖酶xynZF-318在枯草芽孢杆菌WB600中的表达及发酵条件优化

摘要

为了获得产木聚糖酶的重组枯草芽孢杆菌工程菌,本研究将木聚糖酶基因xynZF-318与高表达载体pWB980连接,获得重组载体pWB980/xynZF-318,并将其通过电击转化的方法导入枯草芽孢杆菌感受态细胞WB600,获得重组工程菌WB600/pWB980/xynZF-318.采用单因素及响应面法对该工程菌进行摇瓶发酵工艺优化.结果 表明:重组工程菌WB600/pWB980/xynZF-318最优的发酵条件为:接种量为1.2％、装液量为20mL、种龄为11h、培养温度为37℃、摇床转速为160 r/min、发酵时间为168 h.验证后实际酶活力为0.359 U/mL,与野生株WB600相比酶活提高了2.66倍.本研究成功构建了产木聚糖酶的枯草芽孢杆菌工程菌,有望为木聚糖酶的工业应用尤其是食品工业应用提供新思路.