DNA染料结合环介导等温扩增技术检测志贺氏菌死活细胞

摘要

建立了一种DNA染料（EMA）结合环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）的分析方法（EMA-LAMP）,用于有效检测区分病原微生物志贺氏菌的死活细胞。基于志贺氏菌ipaH基因的六个区域设计特异性的引物,检测志贺氏菌的死活细胞。结果表明:浓度为40μg/mL的EMA能够有效抑制109CFU/mL的死细胞扩增,而对相同浓度的活菌扩增没有影响。分析表明,该方法可以有效区分细菌的死活细胞,克服了传统PCR无法区分死活细胞的弊端,同时EMA-LAMP检测方法耗时短,检测灵敏度高,是一种能够有效鉴别病原菌死活细胞的新方法。