谷氨酰胺预处理对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

摘要

目的 探讨谷氨酰胺预处理对缺氧/复氧损伤后HK-2细胞凋亡的影响.方法 取离体培养的HK-2细胞,随机分成4组:对照组(Con组).CoCl2组:加入300 μM CoCl2处理4h,然后更换正常的培养基培养24 h,之后更换无血清的培养基培养.谷氨酰胺组(GLN组):培养孔中加入10 mmol/L谷氨酰胺预处理24 h后同CoCl2组.ZnPP组:培养孔中加入3 μMZnPP(锌原卟啉,HO-1抑制剂)和10 mmol/L谷氨酰胺处理24 h后同CoCl2组.MTT法测定细胞增殖,流式细胞技术测定细胞的凋亡.RT-PCR技术检测血红素加氧酶-1(Heme oxygenase,HO-1)和凋亡相关基因的表达情况.结果 10 mmol/L谷氨酰胺预处理可以明显增加HK-2细胞的增殖能力,减少凋亡(P＜0.01).预处理上调HO-1的表达,同时上调凋亡抑制基因Bcl-2的表达,下调促凋亡基因caspase-3和NF-κB的表达.而这些调节作用可被ZnPP抑制(P＜0.05或P＜0.01).结论 10 mmol/L谷氨酰胺预处理对缺氧/复氧后HK-2细胞有保护作用,HO-1和凋亡相关基因在预处理中起到重要的作用.