小麦几丁质酶基因Wch2的克隆与表达分析

摘要

利用小麦几丁质酶基因PCR特异片段为探针,分离克隆了一个小麦Chid1 几丁质酶基因Wch2.该基因编码311个氨基酸,不含内含子,具有一个信号肽、一个富含半胱氨酸的几丁质结合区域、两个变异区、两个酶活性区域.Southern分析表明,在小麦基因组中Wch2有多个拷贝.秆锈菌接种诱导Wch2在一对小麦近等基因系中差异表达;在抗病系中国春Sr11中,接种3 d 后Wch2开始表达,6 d后表达量更高;而在感病等基因系中国春sr11中,在所有取样分析的时间内均未检测到Wch2表达.将Wch2克隆到细菌表达载体pET22b,在细菌中表达的重组Wch2具有几丁质酶活性.这些结果说明,分离的Wch2基因在小麦秆锈菌诱导的抗性反应中具有重要作用.